Η παρούσα εργασία είχε ως στόχο να προσδιορίσει την αντιβιοανθεκτικότητα στελεχών Salmonella enteric serotype Enteritidis (SE) ορνίθειας προέλευσης, να μελετήσει την πλασμιδιο-εξαρτώμενη ανθεκτικότητα στην αμπικιλλίνη και να προσδιορίσει την κατανομή μεταξύ των στελεχών των γονιδίων sodCI, sopE και sefA. Τριάντα πέντε SE στελέχη που απομονώθηκαν από νεοσσούς ηλικίας μίας ημέρας, από όρνιθες ωοτοκίας και κρεοπαραγωγής μελετήθηκαν ως προς την ανθεκτικότητα/ευαισθησία σε δεκαέξι αντιβιοτικά. Είκοσι τρία στελέχη (65,7%) εμφάνισαν ανθεκτικότητα στην αμπικιλλίνη, πέντε στελέχη (14,3%) στην αμπικιλλίνη και την τετρακυκλίνη, τέσσερα στελέχη (11,45%) στην τετρακυκλίνη και ένα (2.9%) εμφάνισε πολυ- ανθεκτικότητα. Η ανθεκτικότητα στην αμπικιλλίνη (AmpR) και το συνδυασμό αμπικιλλίνης/τετρακυκλίνης (AmpRTeR) μεταφέρθηκε εύκολα με τη σύζευξη σε όλα τα στελέχη τα οποία – με εξαίρεση δύο- εμφάνισαν μία κοινή πλασμιδιακή ζώνη. Η μοριακή μάζα του πλασμιδίου που έφερε το γονίδιο ανθεκτικότητας στην αμπικιλλίνη προσδιορίστηκε στα 41kbμετά από πέψη του DNA με τα ένζυμα περιορισμού BamHI, HindIII, EcoRI, EcoRV και PstI. Η επαλήθευση του μεγέθους της μοριακής μάζας έγινε με την επίδεση (ligation) στο πλασμίδιο pET29c, των τμημάτων DNA τα οποία προέκυψαν μετά από πέψη με το ένζυμο περιορισμού EcoRI. Για την ανίχνευση των TEM-1 ή/και TEM-2 ß-λακταμασών, χρησιμοποιήθηκαν δύο εξειδικευμένα ζεύγη εκκινητών με τη μέθοδο της αλυσιδωτής αντίδρασης της πολυμεράσης (PCR). Τα προϊόντα της PCR έδειξαν την παρουσία του γονιδίου blaTEM-1 σε όλα τα στελέχη. Ελέγχθηκε επίσης η παρουσία των γονιδίων of SodCI, sopE, sefA με εξειδικευμένους εκκινητές της PCR. Είκοσι δύο (62,8%) στελέχη έφεραν το γονίδιο sodCI, τριάντα τρία (97,2%) το γονίδιο sopE και όλα τα στελέχη ήταν φορείς του γονιδίου sefA
(EL)
Present work aimed to examine the antibiotic resistance of the Salmonella enterica serotype Enteritidis (SE) isolates from poultry, to study the plasmid-mediated ampicillin resistance and to detect and determine the distribution of sodCI, sopE and sefA genes. Thirty-five SE isolates from one-day chicks, layers and broilers were studied for susceptibility/resistance to sixteen antimicrobial agents; 23 (65.7%) of them showed resistance to ampicillin, 5 (14.3%) to ampicillin and tetracycline, 4 (11.45%) to tetracycline and 1 (2.9%) isolate showed multi-drug resistance. Ampicillin (AmpR) and ampicillin/tetracycline (AmpRTeR) resistance was easily transferred by conjugation, and all isolates except two possessed a common band. The molecular mass of the plasmid carrying ampicillin resistance was approximately determined at 41kb after DNA digestion with BamHI, HindIII, EcoRI, EcoRV and PstI restriction enzymes and ligation of EcoRI fragments to pET29c. For the detection of TEM-1 or/and TEM-2 ß-lactamases, two pairs of primers were used in a polymerase chain reaction (PCR). The PCR products showed the presence of blaTEM-1 gene in all isolates. The presence of SodCI, sopE, sefA genes was also examined by PCR. Twenty-two (62,8%) isolates carried the sodCI gene, thirty-four (97,2%) isolates carried the sopE gene and all isolates carried the sefA fimbrial locus.
(EN)
