δείτε την πρωτότυπη σελίδα τεκμηρίου στον ιστότοπο του αποθετηρίου του φορέα για περισσότερες πληροφορίες και για να δείτε όλα τα ψηφιακά αρχεία του τεκμηρίου*
Production and characterisation of bioinspired materials in bacteria
Παραγωγή και χαρακτηρισμός βιοεμπνευσμένων υλικών σε βακτήρια
Πριγκηπάκη, Αριάδνη Ι.
Κοκκινίδης, Μιχάλης
Μητράκη, Α
Πετράτος, Κ.
Χατζηνικολαΐδου, Μ.
Ρανέλλα, Α.
Φαρσάρη, Μ.
Χαλεπάκης, Γ.
Οι ινώδεις πρωτεΐνες αποτελούν τα δομικά στοιχεία πολλών βιολογικών ιστών και
φυσικών υλικών όπως το μαλλί και το μετάξι. Τέτοιες ινώδεις πρωτεΐνες έχουν
ενδιαφέρουσες μηχανικές και ελαστικές ιδιότητες και όλο και περισσότερο χρησιμεύουν
ως μοντέλα για το σχεδιασμό νέων βιουλικών, όπως τα τεχνητά ικριώματα. Τα ικριώματα
αυτά χρησιμοποιούνται για εφαρμογές μηχανικής ιστών, αφού έχει παρατηρηθεί ότι
μπορούν να επάγουν την προσκόλληση, τον πολλαπλασιασμό και τη διαφοροποίηση των
κυττάρων. Μια υποκατηγορία ινωδών πρωτεϊνών χρησιμοποιείται από ιούς σαν όργανα
προσκόλλησης στα κύτταρα. Προηγούμενες μελέτες έδειξαν ότι οκταπεπτίδια που
αντιστοιχούν σε ακολουθίες του μίσχου αυτοοργανώνονται σε ινίδια τα οποία μπορούν να
χρησιμοποιηθούν σαν ικριώματα για εναπόθεση αλάτων ασβεστίου.
Στην παρούσα εργασία επικεντρωθήκαμε στην full length πρωτεΐνη που αντιστοιχεί στην
επικράτεια του μίσχου του αδενοϊού. Το πρώτο μέρος της διατριβής εστιάζεται στην
έκφραση και το δομικό χαρακτηρισμό της ετερόλογης πρωτεΐνης που περιλαμβάνει τα
αμινοξέα 61 - 392, ενώ το δεύτερο μέρος της εργασίας αναφέρεται στην επεξεργασία της
πρωτεΐνης με ακτινοβολία UV (Excimer KrF Laser, λ = 248nm). Κατόπιν διερευνήθηκαν
τα μορφολογικά χαρακτηριστικά των δομών που προέκυψαν από την φωτοαποδόμηση και
οι φωτοχημικές αλλαγές τις οποίες έχουν υποστεί τα πρωτεϊνικά υποστρώματα στις
περιοχές ακτινοβόλησης σε σχέση με τις μη ακτινοβολημένες, οι οποίες αξιολογούνται με
τη μέθοδο LIF (Laser Induced Fluorescence). Καταληκτικά μελετήθηκε η δυνατότητα
καλλιέργειας ινοβλαστών στις ακτινοβολημένες περιοχές και κατά πόσο αυτές αποτελούν
προσφιλές περιβάλλον για την ανάπτυξη και επιβίωση κυττάρων σε σύγκριση με τις μη
ακτινοβολημένες.
Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα ικριώματα τα οποία προέκυψαν αποτελούν μια ιδανική
λύση για εφαρμογές "cell patterning" καθώς τα κύτταρα δείχνουν μια φανερή προτίμηση
για προσκόλληση και πολλαπλασιασμό στις ακτινοβολημένες περιοχές σε σχέση με τις μη
ακτινοβολημένες, ενώ η μέθοδος η οποία προτείνεται αποτελεί μια γρήγορη και
οικονομική εναλλακτική σε σύγκριση με τις συμβατικές μεθόδους κατασκευής
ικριωμάτων.
(EL)
Fibrous proteins are the building blocks of many biological tissues and natural materials
such as wool and silk. They often display very interesting mechanical and elastic properties
and serve as structural scaffolds for the design and production of artificial scaffolds as they
provide support for cell attachment, proliferation and differentiation. A class of fibrous
proteins is used by viruses and bacteriophages as adhesins. In previous studies octapeptides
derived from the adenovirus fiber shaft sequence that self assemble into fibrils, were used
to decorate 3D structures for the deposition of calcium minerals.
The subject of the present thesis is a protein that corresponds to the adenovirus fiber shaft
fragment and has the propensity to self assemble into fibrils. The first part is focused on
the expression and structural characterization of the protein corresponds to amino acids 61
– 392, while in the second part a laser processing technique is presented using single
nanosecond pulses of a KrF laser (λ=248 nm) for the treatment of protein films cast on
quartz plates. After laser treatment of the film surface, a new foamy layer was formed upon
single pulse irradiation. This laser induced micro foam structure was characterized by
several microscopic methods, whereas the photochemical modifications by employing the
laser induced fluorescence (LIF) technique in order to detect the differences between the
irradiated surfaces compared to the non-irradiated ones. Finally the attachment and
proliferation of a model fibroblast cell line on the irradiated and non-irradiated protein
films, was tested and
compared.
The results indicated that the cells attach selectively to the irradiated areas of the protein
film, therefore the laser processing of protein films that we proposed, can be used as a
method for inducing selective cell patterning at the microscale as it is a rapid and low cost
operation.
(EN)
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Διδακτορικές διατριβές
*Η εύρυθμη και αδιάλειπτη λειτουργία των διαδικτυακών διευθύνσεων των συλλογών (ψηφιακό αρχείο, καρτέλα τεκμηρίου στο αποθετήριο) είναι αποκλειστική ευθύνη των αντίστοιχων Φορέων περιεχομένου.
Βοηθείστε μας να κάνουμε καλύτερο το OpenArchives.gr.