Regulation of Ets2 repressor factor by Homeodomain Interacting Protein Kinase 1

 
This item is provided by the institution :
University of Crete
Repository :
E-Locus Institutional Repository
see the original item page
in the repository's web site and access all digital files if the item*
share




2012 (EN)
Ρύθμιση του Ets2 από την Homeodomain Interacting Protein Kinase 1.
Regulation of Ets2 repressor factor by Homeodomain Interacting Protein Kinase 1

Γιαπιτζάκη, Γιολάντα Γεω.

Μαυροθαλασσίτης, Γεώργιος

Ο Ets2 repressor factor (ERF) ανήκει σε μια οικογένεια μεταγραφικών παραγόντων που χαρακτηρίζονται από μια εξελικτικά συντηρημένη Ets δεσμευτική περιοχή. Ο ERF είναι ένας μεταγραφικος καταστολέας που εκφράζεται παντού, κατέχει ογκοκατασταλτική δραστηριότητα και ρυθμίζεται από το Ras / ERK μονοπάτι σηματοδότησης. Ο ERF φωσφορυλιώνεται από ERKs, γεγονός που επηρεάζει τον υπο‐κυτταρικό εντοπισμό του. Επίσης εμπλέκεται στο πέρασμα του κυτταρου απο την φάση G1 κατα τον κυτταρικό κύκλο. Πειράματα yeast‐two hybrid αποκαλύπτουν την αλληλεπίδραση του ERF με μια κινάση, την homeodomain interacting protein kinase 1 (HIPK1). Η HIPK1 ανήκει σε μια οικογένεια τεσσάρων κινασών σερίνης / θρεονίνης (HIPK1‐4), οι οποίες ειναι αρκετά συντηρημένες στα σπονδυλωτά. Ο εντοπισμός τους στον πυρήνα έχει μια speckled οργάνωση και οι δομές αυτές πιθανόν εμπλέκονται στη σηματοδότηση των μηχανισμών μαζί με άλλες πρωτεΐνες. Η HIPK1 έχει επίσης μια δυναμική κατανομή στα υπο‐κυτταρικά διαμερίσματα ανάλογα με τις κυτταρικές συνθήκες. Η αλληλεπίδραση της HIPK1 και του ERF επιβεβαιώθηκε μέσα απο πειράματα ανοσοκατακρήνισης. Η περιοχή αλληλεπίδρασης του ERF με την HIPK1 χαρτογραφείται στο αμινο‐τερματικό τμήμα της πρωτεΐνης και η HIPK1 φωσφορυλιώνει τον ERF in vitro. Στην παρούσα εργασία επιδιώξαμε να προσδιορίσουμε την περιοχή αλληλεπίδρασης της HIPK1 με τον ERF και να βρούμε μια πιθανή λειτουργική συσχέτιση των δύο πρωτεϊνών. Η περιοχή αλληλεπίδρασης της HIPK1 χαρτογραφείται στο καρβοξυ‐τερματικό τμήμα της πρωτεΐνης. Επιπλέον ανοσοϊστοχημικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκανγια να μελετήσουμε την υποκυτταρική κατανομή κολοβών μορίων της HIPK1 και, τέλος, ελέγξαμε εάν η HIPK1 επηρεάζει την ERF διαμεσολαβούμενη μεταγραφική καταστολή. (EL)
Ets2 repressor factor (ERF) belongs to a family of transcription factors characterized by an evolutionary conserved Ets DNA binding domain. The Ets2 repressor factor is a ubiquitously expressed factor with tumor suppressor activity regulated by the Ras/Erk signaling pathway. ERF is phosphorylated by ERKs, which affects its sub‐cellular localization and is also involved in cell cucle progression through G1. A yeast‐two hybrid screen identified homeodomain interacting protein kinase 1 (HIPK1) as a potent Erf interactant protein. HIPK1 belongs to a family of four serine/threonine kinases (HIPK1‐4) highly conserved in vertebrates. Their localization in the nucleus has a speckled organization and these structures are likely involved in signalling mechanisms together with colocalizing proteins. HIPK1 also show a dynamic distribution in the sub‐nuclear compartments depending on the cellular conditions. Immunoprecipitation assays confirmed the interaction between HIPK1 and ERF. The ERF‐HIPK1 interaction is mapped at the amino‐terminal part of the Erf protein and results in ERF phosphorylation in vitro. Here, we sought to identify the HIPK1‐ ERF interaction domain and functional correlation of the two proteins. The interaction domain of HIPK1 is mapped at the carboxy‐terminal part of the protein. Furthermore immunostainings assays were performed to view the subcellular localization of HIPK1 truncated proteins and finally we tested whether HIPK1 affects ERF mediated transcriptional repression. (EN)

text
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης

Μοριακή βιολογία
Κίναση
Immunoprecipitation
Developmental biology
Ανοσοκατακρήμνιση
Molecular biology

Πανεπιστήμιο Κρήτης (EL)
University of Crete (EN)

Greek
English

2012-11-16


Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης



*Institutions are responsible for keeping their URLs functional (digital file, item page in repository site)