Φαρμακογνωστική μελέτη φυτών της οικογένειας Fabaceae (Vicia faba, Lotus edulis, Lotus longisiliquosus, Tetragonolobus purpureus, Lathyrus laxiflorus subsp laxiflorus) και του είδους Oryza sativa της οικογένειας Gramineae

 
Το τεκμήριο παρέχεται από τον φορέα :

Αποθετήριο :
Πέργαμος
δείτε την πρωτότυπη σελίδα τεκμηρίου
στον ιστότοπο του αποθετηρίου του φορέα για περισσότερες πληροφορίες και για να δείτε όλα τα ψηφιακά αρχεία του τεκμηρίου*
κοινοποιήστε το τεκμήριο



Φαρμακογνωστική μελέτη φυτών της οικογένειας Fabaceae (Vicia faba, Lotus edulis, Lotus longisiliquosus, Tetragonolobus purpureus, Lathyrus laxiflorus subsp laxiflorus) και του είδους Oryza sativa της οικογένειας Gramineae

Αγγελής Αποστόλης (EL)

Αντικείμενο της παρούσας διδακτορικής εργασίας αποτελεί ο εντοπισμός και η φαρμακογνωστική μελέτη φυτών της Ελληνικής χλωρίδας με καλές αντιοξειδωτικές και άλλες ιδιότητες, καθώς και η γρήγορη και αποδοτική παραλαβή των εμπεριεχόμενων ουσιών. Μελετήθηκαν φυτοχημικά πέντε είδη της οικογενείας Fabaceae (Vicia faba, Lotus edulis, Lotus longisiliquosus, Tetragonolobus purpureus, Lathyrus laxiflorus subsp. laxiflorus) καθώς και το φυτό Oryza sativa. Από τα φυτά αυτά απομονώθηκαν και ταυτοποιήθηκαν περισσότερα από 100 φυσικά προϊόντα εκ των οποίων τα 12 είναι νέα προϊόντα. Οι κύριες κατηγορίες στις οποίες ανήκουν οι μεταβολίτες αυτοί είναι τα φλαβονοειδή και γλυκοσίδες φλαβονοειδών, τα φαινολικά και καρβοξυλικά οξέα καθώς και οι γλυκοσίδες τους, οι απλοί φαινολικοί γλυκοσίδες καθώς και τα τριτερπένια και οι φαιρουλικοί τους εστέρες. Κεντρικό ρόλο στην απομόνωση των ουσιών έπαιξε η Χρωματογραφία Κατ’ Αντιροή (CCC). Η τεχνική χρησιμοποιήθηκε τόσο για αρχική κλασμάτωση των εκχυλισμάτων (Vicia faba, Lotus longisiliquosus, Tetragonolobus purpureus), όσο και για απευθείας απομόνωση ουσιών από τα αρχικά εκχυλίσματα (Lotus edulis και Lathyrus laxiflorus subsp laxiflorus). Επίσης ιδιαίτερη έμφαση δόθηκε στην ανάλυση άπολων μιγμάτων και στην γρήγορη και αποδοτική παραλαβή ουσιών αυξημένου φαρμακολογικού ενδιαφέροντος (απομόνωση γ-ορυζανόλης από το RBO) H απόδοση της δομής των απομονωθέντων μεταβολιτών πραγματοποιήθηκε με διάφορες φασματοσκοπικές μεθόδους και κυρίως με φασματοσκοπία ΝMR και φασματομετρία HRMS. Ιδιαίτερη έμφαση δόθηκε στην ανάλυση και κατανόηση των φασμάτων NMR και ΜS, στην εξαγωγή συμπερασμάτων και συγκεκριμένων χαρακτηριστικών σταθερών, με σκοπό την ευκολότερη και γρηγορότερη ταυτοποίηση μορίων που ανήκουν στις χημικές κατηγορίες που πραγματεύεται η παρούσα ερευνητική προσπάθεια. Τα αποτελέσματα της παρούσας διδακτορικής εργασίας καταδεικνύουν σαφέστατα ότι τα φυτά της οικογένειας Fabaceae, πέραν της διατροφικής τους αξίας, διαθέτουν και ένα φορτίο δευτερογενών μεταβολιτών με σημαντικές βιολογικές δράσεις και θα μπορούσαν να αποτελέσουν καλές πηγές αντιοξειδωτικών παραγόντων. Επίσης γίνονται εμφανή τα πλεονεκτήματα της χρωματογραφίας Κατ’ Αντιροή στην επεξεργασία πολύπλοκων εκχυλισμάτων και την γρήγορη και αποδοτική παραλαβή τόσο των κύριων δευτερογενών μεταβολιτών όσο και αυτών που βρίσκονται σε μικρότερες ποσότητες. Αξίζει εδώ να σημειωθεί ότι η μετάβαση από την αναλυτική στην παρασκευαστική εφαρμογή (scale-up) συνοδεύεται με σαφή βελτίωση στην ποιότητα του διαχωρισμού γεγονός πολύ ενθαρρυντικό για πιθανή χρήση της τεχνικής σε βιομηχανική κλίμακα. Τέλος συμπεραίνουμε ότι η Υγρή Χρωματογραφία Υπερυψηλής Απόδοσης συνδεδεμένη σε σειρά με Ανιχνευτή Φωτοδιόδων και Φασματογράφο Μάζας Υψηλής Διακριτικής Ικανότητας (UHPLC-DAD-APCI (±)-HRMS), μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως μέθοδος επιλογής για την ανάλυση και τον έλεγχο καθαρότητας πολύπλοκων μιγμάτων ουσιών, παρέχοντας ταυτόχρονα πολύτιμες πληροφορίες ως προς τα δομικά τους χαρακτηριστικά. (EL)
The aim of the present thesis was the detection and study of plants of the Greek flora which showed significant antioxidant activity as well as other biological properties. Moreover emphasis was given in rapid and effective isolation of bioactive compounds from plant extracts with counter-current chromatography (CCC) approaches. Plant extracts of eleven endemic species of the Fabaceae (Leguminosae) family were studied for their possible antioxidant, chemopreventive and antibacterial properties. Methanolic and aqueous extracts of above-ground parts of plants showed the highest activity in antioxidant / chemopreventive tests, while in antimicrobial tests the non-polar extracts appeared to be the most active. Five species with important antioxidant and chemopreventive activity (Vicia faba, Lotus edulis, Lotus longisiliquosus, Tetragonolobus purpureus, Lathyrus laxiflorus subsp. Laxiflorus) were phytochemically investigated. Moreove, Oryza sativa (Graminea) a plant known for its antioxidant properties, was also investigated . From the above plants more than 100 compounds were isolated and identified, of which 12 are new natural products. The isolated metabolites belong to five main categories: flavonoids, simple phenolic compounds, phenolic acids, carboxylic acids and triterpenes conjugated with ferulic acid. The results of this work clearly shows that plants of the Fabaceae family, in addition to their nutritional value, have a plethora of secondary metabolites with significant biological activities and could be important sources of antioxidants. CounderCurent Chromatography (CCC) played a crucial role in the isolation of natural products. The analysis of extracts of Vicia faba, Lotus logisiliquosus and Tetragonolobus purpureus took place by off line coupling of CCC technique with sephadex column or preparative HPLC. In the case of Lotus edulis and Lathyrus laxiflorus, was achieved the direct isolation of active compounds (flavonoids, isoflavones and phenolic acids) from the complex extract using dual mode or gradient mode CCC. Emphasis was also given on the analysis of non-polar mixtures and in efficient isolation of substances with increased pharmacological interest (c-oryzanolis) from rice bran oil (RBO). It is clearly indicated that Counter-Current Chromatography (CCC) is a valuable technique and was successfully employed for rapid and effective separation of natural compounds from crude active extracts. It is worth noting that the transition from analytical to manufacturing application (scale-up) accompanied by a clear improvement in the quality of separation which is very encouraging for potential use of the technique on an industrial scale. The structure elucidation of isolated compounds was performed with various spectroscopic methods, mainly NMR spectroscopy and spectrometry HRMS. Particular emphasis was placed on analysis and understanding of MS and NMR spectra, in drawing conclusions and specific characteristic constants, to easier and faster identification of molecules that belong to chemical classes addressed by this research effort. Finally, the high efficiency liquid chromatography connected in series with photodiode detector and Mass Spectrometer High Resolution (UHPLC-DAD-APCI (±)-HRMS), can be used as a selection method for the analysis and purity control of complex mixtures while providing valuable information on the structural characteristics. (EN)

born_digital_thesis
Διδακτορική Διατριβή (EL)
Doctoral Dissertation (EN)


Ελληνική γλώσσα

2011




*Η εύρυθμη και αδιάλειπτη λειτουργία των διαδικτυακών διευθύνσεων των συλλογών (ψηφιακό αρχείο, καρτέλα τεκμηρίου στο αποθετήριο) είναι αποκλειστική ευθύνη των αντίστοιχων Φορέων περιεχομένου.