Φασματοσκοπία πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού στην ανάλυση μεταβολικού προφίλ βιολογικών δειγμάτων αμνιακού υγρού και ορού αίματος

Χατζηιωάννου Αναστασία - Χρυσοβαλάντου (EL)

Μέχρι σήμερα, απουσιάζει από τη διεθνή βιβλιογραφία κάποια μελέτη που να εξετάζει το ρόλο των διατροφικών συνηθειών της μητέρας στη σύνθεση του αμνιακού υγρού. Η παρούσα μελέτη αποσκοπεί στο να εντοπίσει τυχόν συσχετίσεις μεταξύ των διατροφικών συνηθειών των μητέρων και του μεταβολικού προφίλ του αμνιακού υγρού και του ορού αίματος αυτών, όπως προκύπτουν από την ανάλυση με χρήση της φασματοσκοπίας πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού (NMR). Οι 29 γυναίκες από τις οποίες λήφθηκαν τα βιολογικά υγρά διένυαν το δεύτερο τρίμηνο της κύησης τους (17η – 24η εβδομάδα) και υποβλήθηκαν σε αμνιοπαρακέντηση, στα πλαίσια προγεννητικού ελέγχου. Η ολιστική μεταβολομική προσέγγιση επιτεύχθηκε με χρήση φασματογράφου NMR 600 ΜΗz (Varian), εφαρμόζοντας παλμό CPMG και χρησιμοποιώντας ως εσωτερικό πρότυπο το δινάτριο άλας του μηλεϊνικού οξέος. Η προκατεργασία των δειγμάτων περιελάμβανε λυοφιλίωση, ώστε να επιτευχθεί βελτίωση της έντασης των σημάτων. Μέσω της κατασκευής μοντέλων PLS ελέγχθηκε η συσχέτιση του μεταβολικού προφίλ των αμνιακών υγρών και του ορού αίματος με την εβδομάδα λήψης αυτών, με το Δείκτη Μάζας Σώματος των μητέρων και των διατροφικών συνηθειών τους. Στη συνέχεια, PCA και OPLS-DA μοντέλα χρησιμοποιήθηκαν για να διακρίνουν τα δείγματα στις εκάστοτε ομάδες και εντοπίστηκαν οι υπεύθυνοι για τις παρατηρούμενες διαφοροποιήσεις μεταβολίτες. (EL)

Recent metabonomics’ studies of maternal blood and fetal biological fluids have expanded our knowledge concerning the interchange between the metabolism of fetus and its mother. Nevertheless, hitherto no study has examined the human amniotic fluid (HAF) composition in relation with the maternal habitual diet. The present study aimed to identify correlations between maternal dietary habits and metabolic profiles of HAF and blood serum derived from the NMR analysis. Samples were obtained from 29 women that underwent amniocentesis for prenatal diagnosis (17th - 21th gestational week). Dietary assessment was carried out by qualified registered dietician using a food frequency questionnaire and 24-h recall. The holistic analysis of all samples was accomplished utilizing a 600 MHz Varian NMR spectrometer by applying CPMG pulse sequence and using sodium maleate as internal standard. Sample pretreatment included freeze-drying to increase signal intensities. PLS models were created in order to detect correlations between the metabolic profile of HAF and the gestational week of amniocentesis, the maternal pre-pregnancy BMI, as well as the maternal dietary profile. Thereafter, PCA and OPLS-DA models managed to discriminate samples and metabolites responsible for the observed differentiations were identified. (EN)

born_digital_postgraduate_thesis

Διπλωματική Εργασία (EL)

Postgraduate Thesis (EN)

Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών

Πέργαμος

Διπλωματική Εργασία

Ελληνική γλώσσα

2014

https://pergamos.lib.uoa.gr/uoa/dl/object/uoadl:1320646

uoadl:1320646