Φωσφορυλάση του Γλυκογόνου της Τetrahymena Τhermophila και Μελέτη της Δράσης Αναστολέων του Ενζύμου

 
Το τεκμήριο παρέχεται από τον φορέα :

Αποθετήριο :
Πέργαμος
δείτε την πρωτότυπη σελίδα τεκμηρίου
στον ιστότοπο του αποθετηρίου του φορέα για περισσότερες πληροφορίες και για να δείτε όλα τα ψηφιακά αρχεία του τεκμηρίου*
κοινοποιήστε το τεκμήριο




2015 (EL)

Φωσφορυλάση του Γλυκογόνου της Τetrahymena Τhermophila και Μελέτη της Δράσης Αναστολέων του Ενζύμου

Σπυροπούλου Παναγιώτα (EL)

Η φωσφορυλάση του γλυκογόνου αποτελεί ένα σημαντικό μοριακό στόχο για τη θεραπεία του διαβήτη τύπου 2, καθότι είναι το κυρίαρχο ένζυμο του μεταβολισμού του γλυκογόνου. Το συνεχές επιστημονικό ενδιαφέρον οδήγησε στην ανακάλυψη αρκετών αναστολέων του ενζύμου, οι οποίοι χρησιμεύουν ως πιθανοί αντιδιαβητικοί παράγοντες. Η Tetrahymena thermophila είναι ένα καλά μελετημένο πειραματικό μοντέλο της κυτταρικής και μοριακής βιολογίας, στο οποίο είναι παρόντα σχεδόν όλα τα ένζυμα του μεταβολισμού των υδατανθράκων που απαντώνται και στα θηλαστικά. Στόχος της παρούσας μελέτης είναι να εξεταστεί η χρήση του συγκεκριμένου ευκαρυωτικού μοντέλου για την επιλογή νέων ενώσεων ως πιθανών υπογλυκαιμικών φαρμάκων σε in vivo και in vitro δοκιμασίες, πριν από τη διεξαγωγή πειραμάτων σε θηλαστικά και κλινικών μελετών. Μελετήθηκε λοιπόν η αναστολή της δραστικότητας στην T.thermophila in vitro από τις ενώσεις MNO6B, G2-ANTHRA και AMX117B, οι οποίες έχουν βρεθεί ότι αναστέλλουν τη δραστικότητα της φωσφορυλάσης του γλυκογόνου των μυών κουνελιού (RMGPb). Στο πλαίσιο αυτό, ελέγχθηκε επίσης η δραστικότητα του ενζύμου στο ομογενοποίημα των κυττάρων της T.thermophila και σε όλα τα υποκυτταρικά κλάσματα και διερευνήθηκε περαιτέρω με in silico μελέτη η ύπαρξη του ενζύμου στο πρωτόζωο. Τα ευρήματα που παρουσιάζονται στη μελέτη αυτή υποδεικνύουν την αναστολή της δραστικότητας της φωσφορυλάσης του γλυκογόνου στο ομογενοποίημα των κυττάρων και από τους τρεις αναστολείς της RMGPb. Όπως αποκάλυψε η in silico μελέτη, τα σημαντικά αμινοξέα του καταλυτικού κέντρου και του κέντρου αναστολής της RMGPb απαντώνται και στο αντίστοιχο ένζυμο της T.thermophila.Τα αποτελέσματα στο σύνολό τους αναδεικνύουν την T.thermophila ως ένα χρήσιμο πειραματικό μοντέλο για την επιλογή ενώσεων ως πιθανών υπογλυκαιμικών φαρμάκων. (EL)
Because of its central role in glycogen metabolism, glycogen phosphorylase has been exploited as an important molecular target for type 2 diabetes therapy. The continued scientific interest has led to the discovery of a large number of glycogen phosphorylase inhibitors with anti-diabetic properties. Tetrahymena thermophila is a widely studied model for cellular and molecular biology, in which almost all mammalian enzymes of carbohydrate and glycogen metabolism are present. The current study aims to investigate the utilization of this model eukaryote in screening of new potential anti-diabetic compounds by performing in vivo and in vitro tests before conducting research on mammals and clinical trials. For this purpose, enzyme assays were performed to test the in vitro inhibitory potency of MNO6B, G2-ANTHRA and AMX117B in T.thermophila. These are organic compounds that have been shown to inhibit rabbit muscle glycogen phosphorylase (RMGPb). In this frame, we also examined the enzyme's catalytic activity in cell homogenate and all subcellular fractions and conducted in silico studies to further confirm its presence in the ciliate. The findings presented here indicate that all three RMGPb inhibitors show good inhibition in T.thermophila homogenates, implying the presence of glycogen phosphorylase. As revealed by in silico studies, catalytic and inhibitor site's critical residues of rabbit muscle glycogen phosphorylase are also found in T.thermophila enzyme. All results suggest that T.thermophila is a useful model for the evaluation of potent anti-diabetic agents by using both in vivo and in vitro assays. (EN)

born_digital_postgraduate_thesis
Διπλωματική Εργασία (EL)
Postgraduate Thesis (EN)


Ελληνική γλώσσα

2015





*Η εύρυθμη και αδιάλειπτη λειτουργία των διαδικτυακών διευθύνσεων των συλλογών (ψηφιακό αρχείο, καρτέλα τεκμηρίου στο αποθετήριο) είναι αποκλειστική ευθύνη των αντίστοιχων Φορέων περιεχομένου.