Στόχος της αναπαραγωγικής ιατρικής είναι η μεταφορά ενός γονιμοποιημένου ωαρίου στη μήτρα της γυναίκας με υψηλά ποσοστά επιτυχίας, μειώνοντας έτσι το ποσοστό πολύδυμων κυήσεων που αποτελεί ένα από τα μεγαλύτερα προβλήματα της εξωσωματικής γονιμοποίησης. Η καλλιέργεια των γονιμοποιημένων ωαρίων μέχρι το στάδιο των βλαστοκύστεων αποτελεί ένδειξη της βιωσιμότητας τους, αυξάνει το ποσοστό εμφύτευσης και προσφέρει τη δυνατότητα να συμπεριληφθεί μικρότερος αριθμός τους στη μεταφορά.Η παρούσα μελέτη επικεντρώθηκε στην ανίχνευση των φλεγμονωδών παραγόντων IL1β και IL6 που εκλύονται από τις βλαστοκύστεις προ της μεταφοράς τους στη μήτρα και στο έλεγχο της χρήσης τους ως μέσο επιλογής του καταλληλότερου γονιμοποιημένου ωαρίου για μεταφορά. Συνολικά 300 ασθενείς χωρίστηκαν τυχαιοποιημένα σε 2 ομάδες ανάλογα με το αν η εμβρυομεταφορά τους ήταν την 5η ή την 6η ημέρα ανάπτυξης των βλαστοκύστεων. Σκοπός ήταν να ελεγχθεί, αν η παράταση της μεταφοράς κατά μία ημέρα, χρόνος απαραίτητος για τον έλεγχο των παραγόντων προς ανάλυση, διακυβεύει το ποσοστό επιτυχίας. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι δεν υπάρχει στατιστικά σημαντική διαφορά (P>0.05) σε ποσοστό εμφύτευσης (ΠΕ) και κύησης (ΠΚ) μεταξύ 5ης και 6ης ημέρας μεταφοράς, με την προϋπόθεση ότι κατά την μεταφορά 6ης ημέρας συμπεριλαμβάνονται γονιμοποιημένα ωάρια, τα οποία ήταν βλαστοκύστεις ήδη από την 5η ημέρα. Σε ότι αφορά στους φλεγμονώδεις παράγοντες IL1β και IL6 που εκκρίνονται από τις βλαστοκύστεις προ της μεταφοράς τους στη μήτρα, μετρήθηκαν στο καλλιεργητικό υγρό 683 βλαστοκύστεων, με τη χρήση του συστήματος Luminex, και μεταφέρθηκαν τελικά σε 245 γυναίκες. Η IL1-β ανιχνεύθηκε στο 26,5% των δειγμάτων (179/683) με μέση τιμή 0,099pg/ml και η IL-6 στο 20,35% (139/683) με μέση τιμή 0,046pg/ml (P<0.05). Η διαφορά αυτή είναι στατιστικά σημαντική και παρατηρήθηκε μόνο στα πρώιμα στάδια των βλαστοκύστεων. Η μέση τιμή των IL1-β και IL-6 στις βλαστοκύστεις που εμφυτεύθηκαν ήταν 0,073pg/ml και 0,036pg/ml, ενώ σε εκείνες που δεν εμφυτεύθηκαν 0,0141pg/ml και 0,060pg/ml, αντίστοιχα. Τα αποτελέσματα δεν ανέδειξαν συσχετισμό των επιπέδων συγκέντρωσης των IL1-β και ΙL-6 με το ΠΚ και ΠΕ (P>0,05), αν και τα ποσοστά ήταν αυξημένα στις ομάδες γυναικών που δεν υπήρξε ανίχνευση των παραγόντων. Συμπερασματικά, η βλαστοκύστη εκκρίνει IL-1β και σε μικρότερο βαθμό IL-6, αλλά η μέτρηση των παραγόντων αυτών στο υπερκείμενο των καλλιεργειών των βλαστοκύστεων δεν σχετίζεται με την επιλογή της καταλληλότερης βλαστοκύστης για μεταφορά.
A major goal of reproductive medicine is to identify and transfer embryos with the highest potential for implantation into a woman’s uterus. The culture of human embryos to the blastocyst stage (Day 5 or 6) has been proposed to be a marker of embryo viability, yielding the highest pregnancy rate (PR) and implantation rate (IR) following IVF. Blastocyst embryotransfer (ET) offers the opportunity to include fewer embryos in the ET, without compromising the success rate, minimizing thus the risk of multiple pregnancies. The present study has been focused on the detection of IL-1b and IL-6 secreted by blastocysts before transfer and on the investigation of their potential role as implantation markers. Three hundred patients were randomly allocated to day 5 and day 6 embryotransfer, in order to investigate whether this delay, time essential as to the analysis of the selected factors, would compromise the IVF success rate. Results showed no statistically significant difference (P>0.05) in PR and IR, under the condition that all embryos were already blastocysts by day 5, independently on the day of their transfer.As far as IL-1b and IL-6 concern, they were measured using Luminex IS 200, in the culture media of 683 embryos transferred at the blastocyst stage into 245 women after IVF and were correlated with blastocyst developmental stage and implantation (IR) and pregnancy rates (PR). IL-1β was detected in 26.5% of blastocysts-conditioned media (179/683) with mean value 0.099pg/ml, and IL-6 was detected in 20.35% (139/683) with mean value 0.046pg/ml (statistically significant difference P<0.05). This difference was more pronounced in the less advanced blastocyst stages (P<0.05). The mean values of IL-1β and IL-6 in implanted blastocysts were 0.073pg/ml and 0.036pg/ml and in non-implanted 0.0141pg/ml and 0.060pg/ml, respectively. Both cytokine levels showed no correlation with pregnancy and implantation rates (P>0.05), although both rates were elevated in the groups of non-detectable IL-6 and IL-1β. Results of this study indicate that blastocyst secrete IL-1β and to a lesser extend IL-6, yet measurement of these two cytokines cannot predict blastocyst implantation competence.
