Μαργαρώνη ΜαρίτσαΣκοπός της παρούσας μελέτης ήταν διερεύνηση της ικανότητας πολυλειτουργικών νανοφορέων πολυ(D,L-γαλακτικού–co-γλυκολικού οξέος) (poly (D,L-lactic-co-glycolic acid, PLGA) να επάγουν προστατευτικές αποκρίσεις σε πρότυπο σπλαγχνικής λεϊσμανίασης. Σε νανοφορείς PLGA ενσωματώθηκε εκχύλισμα των προμαστιγωτών μορφών του παρασίτου L. infantum (sLiAg) και το ανοσοενισχυτικό MPLA. Οι νανοφορείς PLGA τροποποιήθηκαν επιφανειακά με ένα 8-πεπτίδιο (p8), η αλληλουχία του οποίου παρουσιάζει ομολογία με την περιοχή πρόσδεσης του TNFα στους υποδοχείς του. Οι νανοφορείς με την επιφανειακή τροποποίηση προσλαμβάνονταν πιο αποτελεσματικά από τα δενδριτικά κύτταρα, γεγονός που αποδίδεται σε ενδεχόμενη στόχευση των δενδριτικών κυττάρων από το p8, αλλά και στη μείωση της απόλυτης τιμής του επιφανειακού φορτίου των νανοφορέων. Η ενσωμάτωση του sLiAg ή και του MPLA, καθώς και η επιφανειακή τροποποίηση με το p8 προκάλεσαν την ωρίμανση και τη λειτουργική διαφοροποίηση των δενδριτικών κυττάρων, τα οποία είχαν την ικανότητα να παρουσιάζουν τα αντιγόνα του παρασίτου σε Τ λεμφοκύτταρα επάγοντας την ειδική ενεργοποίησή τους. Ο εμβολιασμός ποντικών BALB/c με τους νανοφορείς PLGA-sLiAg-MPLA και p8-PLGA-sLiAg είχε ως αποτέλεσμα την ανάπτυξη διαμένουσας προστασίας έναντι της μόλυνσης με L. infantum, μέσω της ενεργοποίησης βοηθητικών και κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων και της καταστολής των υποπληθυσμών ΤΗ2 και Τ ρυθμιστικών λεμφοκυττάρων, προτείνοντας τους νανοσχηματισμούς αυτούς ως υποψήφια εμβόλια έναντι της σπλαγχνικής λεϊσμανίασης.The aim of the present study was to investigate the ability of poly(lactic-co-glycolic) acid (PLGA) nanoparticles (NPs) to induce protection against experimental visceral leishmaniasis. Nanoformulations based on PLGA NPs were synthesized and encapsulated a crude mix of proteins from Leishmania infantum promastigotes (sLiAg) and MPLA, as adjuvant. PLGA NPs were surface-modified with a synthetic 8-peptide mimicking the TNFα docking region, in order to enhance dendritic cell targeting. Surface modified PLGA NPs were taken up more efficiently from dendritic cells compared to non-modified NPs. This is attributed to possible enhancement of dendritic cell targeting, as well as to the reduction of the absolute value of z potential. Incorporation of sLiAg and/or MPLA and surface modification with p8 induced the maturation and functional differentiation of dendritic cells resulting in their enhanced ability of presenting parasitic antigens and activating in vitro T cells. Vaccination of BALB/c mice with PLGA-sLiAg-MPLA or p8-PLGA-sLiAg NPs induced long-lasting protection against L. infantum infection due to activation of T helper and cytotoxic T cell populations and simultaneous suppression of TH2 and regulatory T cell subpopulations. Based on the above results, the nanoformulations used are suggested as candidate vaccines against visceral leishmaniasis.uoadl:1308688greΑνάπτυξη πειραματικού εμβολίου εναντίον ενδοκυτταρικών παθογόνωνborn_digital_thesisΔιδακτορική ΔιατριβήDoctoral Dissertation2016ΦυσιολογίαPhysiologyisi - Physiology includes resources concerned with the normal and pathologic functioning of living cells, tissues, and organisms. Topics include comparative physiology, molecular biochemistry of cell function, applied physiology, and pharmacological intervention in pathophysiological processes.Διδακτορική διατριβήPhD thesisDoctoral dissertationsΕθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο ΑθηνώνGreek Aggregator OpenArchives.gr | National Documentation Centre (EKT)