Φράγκου ΕλένηΗ Χρόνια Νεφρική Νόσος(ΧΝΝ) προσβάλλει το 10-12% του γενικού πληθυσμού. Ανεξάρτητα από το αίτιο που την προκαλεί, η εξέλιξή της συσχετίζεται με τη νεφρική ίνωση, η οποία είναι το τελικό αποτέλεσμα των περισσοτέρων νεφρικών νοσημάτων και ορίζεται ως η συσσώρευση εξωκυττάριας ουσίας στο διάμεσο νεφρικό χώρο. Στο μοντέλο νεφρικής ίνωσης UUO διαπιστώθηκε ότι, η calreticulin υπερεκφράζεται από τα αρχικά στάδια της ινωτικής διεργασίας κυρίως στα επιθηλιακά σωληναριακά κύτταρα. Σκοπός της μελέτης ήταν η διερεύνηση του ρόλου της calreticulin στη νεφρική ίνωση και, συγκεκριμένα, η διερεύνηση του πώς μεταβάλλονται οι ιδιότητες των επιθηλιακών νεφρικών κυττάρων κατά την υπερέκφρασή της. Χρησιμοποιήθηκαν τρεις σειρές ανθρώπινων κυττάρων εγγύς σωληναρίου με αυξανόμενη έκφραση calreticulin, οι οποίες μελετήθηκαν με Πρωτεωμική Ανάλυση. Μέσω λογισμικών προγραμμάτων, οι ταυτοποιημένες διαφορικά εκφραζόμενες πρωτεΐνες κατηγοριοποιήθηκαν και, στη συνέχεια, δημιουργήθηκαν δίκτυα αλληλεπίδρασης πρωτεϊνών. Ως πρωτεΐνες μεγαλύτερου ενδιαφέροντος προς περαιτέρω μελέτη, επιλέγηκαν οι πρωτεΐνες 14-3-3 αφού, μέχρι σήμερα, ο ρόλος και η συμμετοχή τους στη νεφρική ίνωση δεν έχει ακόμα διερευνηθεί. Η υπερέκφρασή τους επιβεβαιώθηκε in vitro. Στη συνέχεια, στο μοντέλο UUO, διαπιστώθηκε, σε αρουραίο και ποντίκι, τόσο με q-PCR όσο και με ανοσοϊστοχημεία και ανοσοφθορισμό, η υπερέκφραση των 14-3-3 πρωτεϊνών στο νεφρικό ιστό και μάλιστα από τα αρχικά στάδια της ινωτικής διεργασίας.Chronic Kidney Disease (CKD) prevalence is 10-12% of the general population. CKD etiology is broad. Irrespective of its causes, CKD progression is related to renal fibrosis which is the final end-point of most of kidney diseases. It is defined as the accumulation of extracellular matrix into the renal interstitium. In the UUO model of renal fibrosis, calreticulin was found to be up-regulated at epithelial tubular cells from the early stages of renal fibrosis. The aim of this study was to investigate the role of calreticulin in renal fibrosis and more specific, to investigate how the cellular phenotype of kidney epithelial tubular cells is altered during calreticulin over-expression. Three proximal tubular cell lines with increased expression of calreticulin were studied with Proteomic Analysis. The identified differentially expressed proteins were categorized and protein-to-protein interaction networks were created. We focused on 14-3-3 proteins since their role and their involvement in renal fibrosis remains unexplored. 14-3-3 protein up-regulation was confirmed in vitro. Using the UUO model in rat and mouse, 14-3-3 protein expression was found to be up-regulated in the kidneys from the early stages of renal fibrosis, using q-PCR, immunihistochemistry and immunofluorescence.uoadl:1310841greΔιερεύνηση του ρόλου της καλρετικουλίνης στη νεφρική ίνωσηborn_digital_postgraduate_thesisΔιπλωματική ΕργασίαPostgraduate Thesis2012Μοριακή ιατρικήMolecular MedicineΜεταπτυχιακή εργασίαMaster thesisΕθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο ΑθηνώνGreek Aggregator OpenArchives.gr | National Documentation Centre (EKT)