Κλήμου ΖωήΟ καρκίνος της ουροδόχου κύστεως αποτελεί το δεύτερο σε συχνότητα και πρώτο σε θνησιμότητα καρκίνο του ουρογεννητικού συστήματος, με την επιθετικότητά του να σχετίζεται με έκφραση της πρωτεΐνης προφιλίνης-1. Η προφιλίνη-1 δεσμεύει τα μονομερή της β-ακτίνης και ρυθμίζει τον πολυμερισμό της ως απόκριση σε εξωκυτταρικά σήματα. Σκοπός της παρούσας ερευνητικής εργασίας είναι η μελέτη της επίδρασης της πρωτεΐνης προφιλίνης-1 στη μεταστατική κυτταρική σειρά καρκίνου ουροδόχου κύστεως, Τ24Μ, μέσω προσδιορισμού του δυναμικού εμφάνισης όγκων και μεταστατικότητας των καρκινικών κυττάρων με τη χρήση του γονιδίου αναφοράς της λουσιφεράσης. Αρχικά, δημιουργήθηκαν γενετικώς τροποποιημένα κύτταρα Τ24Μ με λεντιϊκούς φορείς, τα κατεσταλμένης προφιλίνης-1 Τ24Μ shPFN1 και τα κύτταρα ελέγχου Τ24Μ shSCRAMBLED. Μείωση στην έκφραση της προφιλίνης-1 στα κύτταρα T24M οδήγησε σε μειωμένο πολυμερισμό της ακτίνης, αναστολή της κυτταρικής κινητικότητας και της ικανότητας προσκόλλησης στην εξωκυτταρική ουσία, αυξημένη παραγωγή γνωστών ογκο-κατασταλτικών παραγόντων και μείωση των επιπέδων αγγειογενετικών πρωτεϊνών. Επιπλέον, η έλλειψη της προφιλίνης-1 οδήγησε σε μειωμένη αύξηση και μετάσταση των καρκινικών όγκων in vivo, μετά από εμβολιασμό των σημασμένων με λουσιφεράση καρκινικών κυττάρων σε NOD/SCID ποντίκια. Συμπερασματικά προτείνεται ότι η προφιλίνη-1 έχει ενεργό ρόλο σε διάφορες λειτουργίες των καρκινικών κυττάρων ουροδόχου κύστεως και κυρίως στη μεταναστευτική τους ικανότητα.Bladder cancer is the second in incidence and first in mortality cancer of the genitourinary system and its aggressiveness has been correlated with the expression of profilin-1. Profilin-1 binds monomeric-actin and regulates polymerization in response to extracellular signals. In this thesis, we transduced the Τ24Μ cell line with a lentiviral vector that includes shRNA sequence complementary to profilin-1 (shPFN1) or shRNA non targeting sequence (shSCRAMBLED) οr a vector with the reporter gene of luciferase. Decrease of profilin-1 expression in T24M cells resulted in decreased polymerization of actin and inhibition of cell motility and adhesion to extracellular matrix. Furthermore, decreased levels of profilin-1 were correlated with down-regulation of factors related to angiogenesis, migration and metastasis and up-regulation of proteins with onco-suppressor activity. In addition, decreased levels of cytoplasmic profilin-1 resulted in reduction οf tumour formation and metastasis in vivo, after injection of T24M cells that expressed the reporter gene of firefly luciferase, in NOD/SCID mice. In conclusion, it is indicated that profilin-1 has an active role in important functions of bladder cancer cells. This protein could be an ideal prognostic marker of the occurrence of bladder cancer or a cancer marker for the transition from non-invasive to invasive type of cancer.uoadl:1311255greΕπίδραση της πρωτεΐνης προφιλίνης-1 στον καρκίνο της ουροδόχου κύστεως – In vivo προσέγγιση εντοπισμού μεταστάσεων με τη χρήση του γονιδίου της λουσιφεράσηςborn_digital_postgraduate_thesisΔιπλωματική ΕργασίαPostgraduate Thesis2015Μοριακή ιατρικήMolecular MedicineΜεταπτυχιακή εργασίαMaster thesisΕθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο ΑθηνώνGreek Aggregator OpenArchives.gr | National Documentation Centre (EKT)