Ο Ανθρώπινος Κυτταρομεγαλοιός (HCMV), εκμεταλλεύεται σηματοδοτικά
μονοπάτια του κυττάρου-ξενιστή ώστε να καταφέρει να αντιγράψει το δίκλωνο DNA
του. Στη παρούσα διδακτορική διατριβή, αποδείξαμε ότι τα H-Ras
μετασχηματισμένα κύτταρα εμφανίζουν αυξημένη μολυσματικότητα στον HCMV
συγκριτικά με τα γονικά τους μη μετασχηματισμένα κύτταρα. Τόσο τα ιικά σωμάτια,
όσο και οι ιικές πρωτεΐνες που μελετήθηκαν, βρέθηκαν αυξημένα στα μολυσμένα-
μετασχηματισμένα κύτταρα και αποτελούν δείκτη ενεργής λοίμωξης από τον
ανθρώπινο κυτταρομεγαλοιό. Η χρήση αναστολέων της ενεργοποίησης του
κυτταρικού μονοπατιού Ras είχε ως αποτέλεσμα την αναστροφή της μόλυνσης στα
μετασχηματισμένα κύτταρα. Σε κυτταρικό επίπεδο, τα μολυσμένα με HCMV
μετασχηματισμένα κύτταρα σχημάτισαν ευδιάκριτα συσσωματώματα. Τα
συγκεκριμένα μορφολογικά ευρήματα ήταν περισσότερα σε αριθμό και μεγαλύτερα
σε μέγεθος από αυτά που παρατηρήθηκαν στα μη-μετασχηματισμένα κύτταρα.
Επιπροσθέτως, μετρήσεις του ρυθμού πολλαπλασιασμού των κυττάρων, έδειξαν ότι
τα μολυσμένα μετασχηματισμένα κύτταρα πολλαπλασιάζονται γρηγορότερα από τα
μη μολυσμένα και από τα μη μετασχηματισμένα κύτταρα. Τα μετασχηματισμένα
κύτταρα βρέθηκε να είναι περισσότερο επιρρεπή στη διαδικασία της απόπτωσης
από ότι τα φυσιολογικά. Συμπερασματικά, τα αποτελέσματα της παρούσας
διατριβής αποδεικνύουν την εμπλοκή του Ανθρώπινου Κυτταρομεγαλοιού στο
κυτταρικό σηματοδοτικό μονοπάτι Ras, με τα κύτταρα που φέρουν το μεταλλαγμένο
Ras γονίδιο να είναι περισσότερο επιρρεπή στη μόλυνση.
(EL)
HCMV utilizes cellular signal transduction pathways to activate viral or cellular
transcription factors involved in the control of viral gene expression and DNA
replication. In the present study, we demonstrate that H-ras-transformed cells show
increased permissiveness to HCMV when compared to their parental nontransformed
cells. Both the progeny viral yield and the protein levels were elevated
in the HCMV-infected H-ras-transformed cells requiring active viral gene replication,
as shown by the infection with UV-inactivated HCMV. Inhibition of Ras or of key
molecules of the Ras pathway, effectively suppressed viral infection in the H-rastransformed
cells. On a cellular level, the HCMV-infected H-ras-transformed cells
formed larger cellular foci, which were significantly higher in number, compared to
the uninfected cells and preferentially recruited HCMV virions, thereby incriminating
HCMV infection for the increased transformation of these cells. Furthermore,
proliferation assays revealed a higher rate for the HCMV-infected H-ras-transformed
cells compared to mock-infected cells, whereas HCMV infection had no considerable
effect on the proliferation of the non-transformed cells. Higher susceptibility to
apoptosis was also detected in the HCMV-infected ras-transformed cells, which in
combination with the higher progeny virus reveals a mode by which HCMV achieves
efficient spread of infection in the cells expressing the oncogenic H-ras (12V) gene.
Collectively, our data suggest that Human Cytomegalovirus employs the host-cell Ras
signaling pathway to ensue viral expression and ultimately successful propagation.
Transformed cells with an activated Ras signaling pathway are therefore particularly
susceptible to HCMV infection.
(EN)
