In the present postgraduate dissertation, a new way of synthesis of human Relaxin-2
was carried out, which is a subject of study for many researchers due to its particular
biological action. In particular, three separate portions of the B chain were synthesized
in solid phase, using as a substrate the 2-CTC resin and were combined by liquid phase
condensation method. The points that were selected for the separation of the peptide
segments were not random, as the carboxy terminus was the Gly residue, in order to
avoid racemization during the union of segments. Chain combination-formation of
disulfide bonds with the A chain of Relaxin took place, which was already prepared as
a lyophilized peptide. Τhe purification and reduction reaction of Met 25 sulfoxide were
the next steps. The latter processes of the peptide were those of the second purification
and the exchange from TFA to acetate salt in order to lyophilize for the second and last
time.
(EL)
Στη παρούσα μεταπτυχιακή εργασία, πραγματοποιήθηκε ένας νέος τρόπος σύνθεσης
της Β αλυσίδας της ανθρώπινης RLX-2, η οποία αποτελεί θέμα μελέτης από πολλούς
ερευνητές λόγω της ιδιαίτερης βιολογικής της δράσης. Συγκεκριμένα τρία ξεχωριστά
τμήματα της Β αλυσίδας συντέθηκαν σε στερεή φάση χρησιμοποιώντας σαν
υπόστρωμα τη 2-CTC ρητίνη, ενώ ενώθηκαν με τη μέθοδο τμηματικής συμπύκνωσης
σε υγρή φάση. Τα σημεία τα οποία επιλέχθηκαν για τα διαχωρισμό των πεπτιδικών
τμημάτων δεν ήταν τυχαία καθώς στο καρβόξυ τελικό άκρο υπήρχε το κατάλοιπο της
Gly προκειμένου να αποφευχθεί η ρακεμίωση κατά τη ένωση των τμημάτων. Επίσης
πραγματοποιήθηκε η διασύνδεση-δημιουργία των δισουλφιδικών δεσμών με την Α
αλυσίδα της RLX η οποία ήταν ήδη έτοιμη με τη μορφή λυόφιλου πεπτιδίου. Επόμενο
βήμα ο καθαρισμός και η αντίδραση αναγωγής της Met 25 sulfoxide. Τελευταίες
διεργασίες του πεπτιδίου ήταν αυτές του δεύτερου καθαρισμού και της ανταλλαγής από
TFA σε οξικό άλας, προκειμένου να λυοφιλοποιηθεί για δεύτερη και τελευταία φορά.
(EL)
University of Patras
