ΣΤΗΝ ΕΡΓΑΣΙΑ ΑΥΤΗ ΠΑΡΟΥΣΙΑΖΕΤΑΙ ΓΙΑ ΠΡΩΤΗ ΦΟΡΑ Η ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΦΩΣΦΑΤΑΣΗ ΤΗΣ 1,6-ΔΙΦΩΣΦΟΡΙΚΗΣ ΦΡΟΥΚΤΟΖΗΣ ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ΠΛΑΚΟΥΝΤΑ. Η ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΠΟΥ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΤΗΚΕ ΕΧΕΙ ΤΑ ΠΑΡΑΚΑΤΩ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ: 0,03 U/G ΙΣΤΟΥ ΑΛΚΑΛΙΚΟ ΒΕΛΤΙΣΤΟ ΡΗ ΜΟΡΙΑΚΟ ΒΑΡΟΣ 26.000, ΚΜ=2,6Χ10-5Μ ΣΕ ΟΥΔΕΤΕΡΟ ΡΗ. ΒΡΕΘΗΚΕ ΕΠΙΣΗΣ ΟΤΙ ΤΟ ΕΝΖΥΜΟ ΣΤΟΝ ΠΛΑΚΟΥΝΤΑ ΑΝΑΣΤΕΛΛΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟ ΑΜΡ ΜΕ ΚΙ=3,3Χ10-4 Μ ΣΕ ΡΗ=7,4 . ΕΠΙΣΗΣ ΑΝΑΣΤΕΛΛΕΤΑΙ ΑΠΟ ΠΕΡΙΣΣΕΙΑ ΤΟΥ ΥΠΟΣΤΡΩΜΑΤΟΣ ΤΗΣ 1,6- ΔΙΦΩΣΦΟΡΙΚΗΣ ΦΡΟΥΚΤΟΖΗΣ. ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΗ ΠΡΟΥΠΟΘΕΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΗΣ ΦΩΣΦΑΤΑΣΗΣ ΤΗΣ 1,6-ΔΙΦΩΣΦΟΡΙΚΗΣ ΦΡΟΥΚΤΟΖΗΣ ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ΠΛΑΚΟΥΝΤΑ ΕΙΝΑΙ ΥΠΑΡΞΗ ΣΥΝΘΗΚΩΝ ΠΟΥ ΜΕΙΩΝΟΥΝ ΣΤΟ ΕΛΑΧΙΣΤΟΤΗ ΠΡΩΤΕΟΛΥΤΙΚΗ ΔΙΑΣΠΑΣΗ (ΥΓΡΟ ΑΖΩΤΟ). ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ΠΛΑΚΟΥΝΤΑ ΑΝΙΧΝΕΥΘΗΚΕ ΚΑΙ ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΘΗΚΕ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΑΤΡ-ΔΙΦΩΣΦΟΥΔΡΟΛΑΣΗΣ (DIP-DPH)F ΣΕ ΕΝΑ ΜΕΜΒΡΑΝΙΚΟ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑ (Ρ37). Η ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΑΥΤΗ ΥΔΡΟΛΥΕΙ ΤΟ ΑΤΡ ΣΕ ΑΜΡ ΚΑΙ ΑΝΟΡΓΑΝΟ ΦΩΣΦΟΡΙΚΟ (ΡΙ) ΜΕΣΩ ADP. Η ΑΤΡ-ΔΙΦΩΣΦΟΥΔΡΟΛΑΣΗ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΕΙΤΑΙ ΑΠΟ MGH ΚΑΙ CA++ ΕΝΩ ΑΝΑΣΤΕΛΛΕΤΑΙ ΑΠΟ ΝΑΝ3 ΚΑΙ ΝΑΙ. ΑΝΑΣΤΟΛΕΙΣ ΑΤΡΑΣΩΝ, ΑΛΚΑΛΙΚΗΣ ΦΩΣΦΑΤΑΣΗΣ ΚΑΙ ΜΥΟΚΙΝΑΣΗΣ ΔΕΝ ΕΠΗΡΕΑΖΟΥΝ ΤΗΝ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΣΤΟΝ ΑΝΡΘΩΠΙΝΟ ΠΛΑΚΟΥΝΤΑ. Η ΑΤΡ-DPH ΕΧΕΙ ΜΕΓΑΛΗ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΗ ΣΗΜΑΣΙΑ ΔΙΟΤΙ ΥΔΡΟΛΥΕΙ ΤΟ ADP ΠΟΥ ΕΙΝΑΙ ΕΝΑΣ ΙΣΧΥΡΟΣ ΠΑΡΑΓΟΝΤΑΣΣΥΣΣΩΡΕΥΣΗΣ ΤΩΝ ΑΙΜΟΠΕΤΑΛΙΩΝ.
FRUCTOSE 1,6-BISPHOSPHATASE (FRUCTOSE) HAS BEEN IDENTIFIED IN EXTRACTS OF HUMANTERM PLACENTA UNDER CONDITIONS WHERE THE PLACENTA WAS FROZEN IN LIQUID NITROGEN IMMEDIATELY AFTER DELIVERY . THE ENZYMATIC ACTIVITY 0.03 MMOLES FRU-P2/MIN/G TISSUE WAS FOUND TO HAVE AN ALKALINE PH OPTIMUM AND MW OF 26,000 DALTONS. THE MICHAELS-MENTEN CONSTANT FOR FRU-P2 WAS FOUND TO BE 2,6X10-5M AT PH 7,4 AMP, AS STRONG INHIBITOR OF FRU-P2ASES, INHIBITED THE ACTIVITY WITH A K1 3,3X10-4M AT PH 7,4. THESE RESULTS INDICATE THE PRESENCE OF A PROTELYSED FORM OF FRUCTOSE-1,6-BISPHOSPHATASE IN HUMAN TERM PLACENTA. ATP-DISPHOSPHOHYDROLASE (ATP-DPH) HAS BEEN ALSO IDENTIFIED IN HUMAN TERM PLACENTA ATP-DPH ACTIVITY WAS FOUND TO BE ASSOCIATED WITH A PARTICULATE FRACTION (P37). IT HYDROLYSES ATP TO AMI AND INORGANIC PHOSPHATE THROUGH ADP. THE PH OPTIMUM OF ATP-DPH IS 8,0-8,5. THE ENZYME IS ACTIVATED BY MG2+(IMM) BY NAF OR NAN3 WHILE INHIBITORS OF ATPASES, MYOKINASE ANDALKALINE PHOSPHATASE HAVE NO EFFECT. ATP-DPH DEGRADES ADP THUS PREVENTING PLATELET AGGREGATION AND BLOOD CLOTTING. THE PHYSIOLOGICAL ROLE OF THIS ENZYME WILLBE FURTHER INVESTIGATED WHEN THE ACTIVITY IS SOLUBILIZED AND PURIFIED.