H ερευνητική αυτή εργασία είχε σα στόχο την απομόνωση, βιοχημική μελέτη και τον χαρακτηρισμό των οπιοειδών υποδοχέων του κεντρικού νευρικού συστήματος του επιμύος. Χρησιμοποιήθηκαν τρία διαφορετικά βιολογικά παρασκευάσματα Α)συναπτοσωμικές μεμβράνες εγκεφάλου επιμυός, Β)διαλυτοποιημένες συναπτοσωμικές μεμβράνες με το ανιονικό απορρυπαντικό DOCNA, Γ)απομονωμένος υποδοχέας μετά από χρωματογραφία χημικής συγγένειας με την ρητίνη affi-nal. Τα αποτελέσματα συνοψίζονται πιο κάτω: Ι)διαλυτοποίηση ενεργών οπιοειδών υποδοχέων σε σχετικά υψηλή απόδοση και με σταθερές πρόσδεσης για αγωνιστές και ανταγωνιστές που προσεγγίζουν αυτές του συναπτοσωμικού παρασκευάσματος. ΙΙ)απομόνωση ενεργών υποδοχέων με χρωματογραφία χημικής συγγένειας affi-nal οι οποίοι δείχνουν εξειδίκευση στην πρόσδεση, Δ-οπιοειδών. ΙΙΙ)ανάπτυξη πολυκλωνικών αντισωμάτων του απομονωμέου Δ-οπιοειδούς υποδοχέα και περαιτέρω μελέτη αυτού με τη χρήση των αντισωμάτων.
(EL)
This work is aiming at the isolation, biochemical study and characterization of opioid receptors in rat central nervous system using three different biological preparations A)rat brain synaptosomal membranes, B)synaptosomal membranes solubilized with DOCNA, C)the isolated receptor by affinity chromatography with the affi-nal resin. The results are summarized below: I)solubilization of active opioid receptors in high yield with binding parameters for agonists and antagonists which are close to those of the synaptosomal preparation. II)isolation of active receptors, using affi-nal affinity chromatography, the bound selectively Δ-opioid ligands. III)generation of polyclonal antibodies against the isolated Δ-opioid receptor followed by further characterization of the receptor using the partially purified antibodies.
(EN)
University of Crete
