Medicinal and cytotoxic properties have been attributed to the extracts derived
from the plants of the Helleborus family since the ancient times. Nowadays the
Helleborus extract has sparked the interest of the scientific community once again
because of its possible anticancerous activity, which is supposed to be a result of the
cardiac steroids that are existent in it. Several scientific groups have been studying the
effect of specific components found in the Helleborus extract against cancer cell lines
in vitro and in vivo in clinical trials.
However, the effect of the extract to leukocytes has yet to be extensively studied.
In the present study we investigated how the aqueous extract of an indigenous to the
Balkans plant of the Helleborus family, Helleborus cyclophyllus, affects leukocytes
when incubated in its presence. For that reason, we examined the viability,
degranulation and the phagocytosis rates of different subpopulations of the leukocytes
as well as the expression of certain signaling key molecules (such as p-p38 and pMEK),
isolated from these cells, under the effect of the extract.
The results of our experiments indicated that the cytotoxic effect of the extract is
apparent at concentrations greater than 3mg/ml both in granulocytes and monocytes,
reducing their number by 50-60% at the concentration of 5mg/ml of the extract. In
lymphocytes the effect was less adverse reducing their viability by 20-30% at 5mg/ml.
The phagocytosis rates were also lower in the samples, in which the leukocytes were
incubated with the extract compared to the control samples, however after statistical
analysis these reduced rates were not considered significant. Regarding the
concentration of certain key signaling molecules after incubation with the extract, an
increase in the concentration of p-p38 was shown, whereas the pMEK levels were
shown to be reduced as the extract concentration increased.
(EL)
Στα εκχυλίσματα των φυτών της οικογένειας του Helleborus έχουν αποδοθεί από
την αρχαιότητα τόσο φαρμακευτικές όσο και κυτταροτοξικές ιδιότητες. Σήμερα το
ενδιαφέρον της επιστημονικής κοινότητας έχει επιστρέψει στις ιδιότητες του
Helleborus, καθώς η κυτταροτοξική του δραστηριότητα, η οποία υποπτεύεται να
οφείλεται στα καρδιακά στεροειδή που περιέχονται σε αυτό, θα μπορούσε πιθανώς να
είναι και αντικαρκινική. Πλειάδα ερευνητών έχουν διερευνήσει την επίδραση του
εκχυλίσματος του Helleborus και κλασμάτων που περιέχονται σε αυτό σε καρκινικές
σειρές in vitro αλλά και in vivo σε κλινικές δοκιμές.
Παρ` όλα αυτά η δράση του εκχυλίσματος σε πληθυσμούς του ανοσοποιητικού
δεν έχει διερευνηθεί εκτενώς και αυτό έδωσε το έναυσμα σε εμάς να μελετήσουμε in
vitro τις επιδράσεις του υδατικού εκχυλίσματος του ενδημικού στην περιοχή των
Βαλκανίων Helleborus cyclophyllus σε λευκοκυτταρικούς πληθυσμούς. Για αυτό το
λόγο λευκοκύτταρα και υποπληθυσμοί τους όπως Τ λεμφοκύτταρα επωάστηκαν υπό
διαφορετικές συγκεντρώσεις του εκχυλίσματος και για διαφορετικά χρονικά
διαστήματα και στη συνέχεια σε αυτά πραγματοποιήθηκαν έλεγχοι βιωσιμότητας,
αποκοκκίωσης, φαγοκυτταρικής ικανότητας και στα πρωτεϊνικά εκχυλίσματα αυτών
των κυττάρων ελέγχθηκε η έκφραση σηματοδοτικών μορίων κλειδιών, όπως η p-p38
και pMEK.
Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το εκχύλισμα διαθέτει κυτταροτοξικές ιδιότητες οι
οποίες είναι αισθητά διακριτές σε συγκεντρώσεις μεγαλύτερες των 3mg/ml στους
πληθυσμούς των κοκκιοκυττάρων και των μονοκυττάρων, προκαλώντας μείωση ως και
της τάξης του 50%-60% στη συγκέντρωση 5mg/ml του εκχυλίσματος έπειτα από
επώαση μιας ώρας. Στα λεμφοκύτταρα η επίδραση ήταν ασθενέστερη της τάξης του
20-30%. Μείωση παρατηρήθηκε και στην φαγοκυττάρωση υπό την επίδραση του
εκχυλίσματος του Helleborus, η οποία όμως δεν ήταν στατιστικά σημαντική. Σχετικά
με τη συγκέντρωση σηματοδοτικών μορίων, η οποία μελετήθηκε ποιοτικά με
ανοσοαποτυπώματα κατά Western, τα αποτελέσματα έδειξαν μικρή αύξηση της p-p38 και
μείωση της pMEK όσο αυξάνεται η συγκέντρωση του εκχυλίσματος.
(EL)
University of Patras
