Η λίστα Απαγορευμένων Ουσιών, που ανανεώνεται και ανακοινώνεται σε ετήσια βάση
από την Παγκόσμια Αρχή Αντι-Ντόπινγκ, περιλαμβάνει έναν μεγάλο αριθμό ουσιών-
χαμηλού, σχετικά, μοριακού βάρους. Οι ουσίες αυτές ποικίλουν ως προς τη δομή,
τις φυσικοχημικές ιδιότητες και τη φαρμακολογική δράση (π.χ αναβολικοί
παράγοντες, διουρητικά, διεγερτικά, ναρκωτικά, κορτικοστεροειδή). Στο πλαίσιο
αυτό, η παρούσα μελέτη αποσκοπεί στην ανάπτυξη μεθόδων για τον ποιοτικό
προσδιορισμό (επιβεβαίωση) των ουσιών σε ούρα αθλητών που θα συμβάλλει θετικά
στην αποφυγή της συνηθισμένης-αλλά χρονοβόρας-διαδικασίας προετοιμασίας τους.
Πρόκειται για εξειδικευμένες μεθόδους για κάθε μία ουσία οι οποίες βασίζονται
στα διαφορετικά χαρακτηριστικά των ουσιών. Αναπτύχθηκαν μέθοδοι στο
LC-ESI/QTOFMS στις οποίες επιλέχθηκαν α) οι βέλτιστες συνθήκες στη λειτουργία
της πηγής ιοντισμού για τη μεγιστοποίηση της αφθονίας του πρωτονιωμένου
μοριακού ιόντος της κάθε ουσίας, β) οι βέλτιστες συνθήκες θραυσματοποίησης ώστε
να δημιουργούνται τουλάχιστον δύο διαγνωστικά θραύσματα για κάθε ουσία και
ταυτόχρονα να μην εξαφανίζεται το πρωτονιομένο μοριακό ιόν. Οι παράμετροι
ταυτοποίησης που εξετάστηκαν είναι ο χρόνος κατακράτησης της ουσίας, το μοριακό
ιόν, το δυναμικό της πηγής θραυσματοποίησης, η ενέργεια θραυσματοποίησης και ο
αριθμός των θραυσμάτων του μοριακού ιόντος. Εν προκειμένω, εφαρμόστηκε η
τεχνική της υγροχρωματογραφίας συζευγμένης με δίδυμης φασματομετρίας μαζών με
αναλυτή χρόνου πτήσης χρησιμοποιώντας τη σάρωση επιλεγμένων ιόντων ώστε να
καταγράφεται ένα χαρακτηριστικό ιόν για κάθε έναν από τους αναλύτες. Η μέθοδος
εφαρμόστηκε σε δείγματα πολυσυστατικών που παρασκευάστηκαν στο εργαστήριο.
(EL)
The list of prohibited substances, which is renewed and announced annually from
the World-Anti Doping Agency, includes a variety of low molecular weight
substances. These substances are varied in structure, physicochemical
properties and pharmacology’s behavior (e.g. anabolic agents, stimulants,
narcotics, diuretics, corticostereoids). The aim of this study was to develop
novel methods for the confirmation procedure of these substances. This process
leads to avoid the common but time-consuming stage of their preparation. The
developed methods are specific for each substance and are based on their
different characteristics.
LC-ESI/QTOF-MS methodology included a) the optimization of the ion source
parameters to obtain the maximum abundance of the protonated molecular ion of
each analyte b) the optimization of the in source CID fragmentation and
off-source Q2 fragmentation parameters so as to obtain three diagnostic
fragments for each analyte along with the protonated molecular ion. The
identification parameters that were evaluated are the retention time, the
molecular ion, the fragmentor voltage, collision energy and the number of ion
fragments. The method was applied in multi-component solutions which were
prepared in the laboratory.
(EN)
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
