Το άγχος θεωρείται ευρέως ως μια φυσιολογική απόκριση του σώματός μας σε θετικές ή αρνητικές συνθήκες. Ωστόσο, στις μέρες μας, το ψυχολογικό στρες και οι διαταραχές που σχετίζονται με αυτό εγείρουν σημαντική ανησυχία για την υγεία. Βραχυπρόθεσμα, το οξύ στρες μπορεί να ενισχύσει την ανοσολογική απόκριση, ενώ το χρόνιο στρες είναι μια παθολογική κατάσταση που την μειώνει και οδηγεί σε διαταραχές στο μεταβολικό σύστημα
Αν και τα εγκεφαλικά κυκλώματα που εμπλέκονται στη συναισθηματική επεξεργασία έχουν μελετηθεί εκτενώς, λίγα είναι γνωστά για το πώς ο εγκέφαλος ανταποκρίνεται στην έκθεση στο στρες. Προς αυτή την κατεύθυνση, ένα νέο πεδίο στην αναλυτική βιοχημεία, η μεταβολομική προσφέρει ολιστική αντιμετώπιση. Η μεταβολομική αναφέρεται στην αναγνώριση, ποσοτικοποίηση και χαρακτηρισμό μικρών μεταβολιτών.
Στην παρούσα διπλωματική εργασία, πραγματοποιήθηκε μεταβολομική μελέτη για την επίδραση του πρόωρου μητρικού απογαλακτισμού σε μοντέλα ποντικιών (MSEW, maternal separation and early weaning). Συγκεκριμένα, έγινε προσδιορισμός των μεταβλητών που διαφοροποιούνται μετά από επιβολή κατάστασης στρες, σε δείγματα εγκεφάλων, έπειτα από in vivo μελέτη του περιγεννητικού άγχους. Χρησιμοποιήθηκαν 60 εγκέφαλοι στρεσαρισμένων και μη ποντικιών, αρσενικών και θηλυκών. Στη συνέχεια, πραγματοποιήθηκε λήψη των εγκεφάλων, εφαρμόζοντας συγκεκριμένο πρωτόκολλο εκχύλισης ιστών (σύστημα MeOH/H2O) και προσδιορισμός των μεταβολικών τους προφίλ με την χρήση UPLC-QTOF-MS σε θετικό και αρνητικό ιοντισμό ΕSI. Η επεξεργασία των ληφθέντων φασμάτων πραγματοποιήθηκε με τη χρήση του λογισμικού MSDial 4.9.22. Τα φασματικά δεδομένα υποβλήθηκαν σε πολυπαραμετρική στατιστική ανάλυση με τις επιβλεπόμενες και μη μεθόδους Principal Component Analysis (PCA), Partial Least Squares Discriminant Analysis (PLS-DA) και Orthogonal-PLS (OPLS-DA).
(EL)
Stress is widely considered as a normal response of our body to positive or negative circumstances. However, nowadays, psychological stress and stress-related disorders raise a major health concern. In the short term, acute stress may boost the immune response, while chronic stress is a pathological condition that diminishes it and leads to disorders in the metabolic system.
Although the brain circuits involved in emotional processing are extensively studied, little is known about how cerebellum responds to stress exposure. Towards this direction, a new field in analytical biochemistry, metabolomics offers a holistic approach Metabolomics refers to the identification, quantification and characterization of small metabolites in the metabolome.
This study focuses on the effects of maternal separation and early weaning (MSEW) on mice cerebellum and highlights the involvement of cerebellum in stress responses. For this acute stressor, a metabolomics’ model was developed aiming to the identification of the metabolites produced by the respective stress exposure. The metabolites were determined in brain samples, following an in-vivo study of perinatal anxiety. More specifically, the cerebellar metabolomic profiles of stressed versus control male and female mice were analyzed. Τhe brain tissues were obtained, applying a specific tissue extraction protocol (MeOH/H2O system) and their metabolic profiles were determined using UPLC-QTOF-MS in positive and negative ESI ionization. Processing of the acquired spectra was performed using MSDial 4.9.22 software. Spectral data were subjected to multivariant statistical analysis with the supervised and unsupervised Principal Component Analysis (PCA), Partial Least Squares Discriminant Analysis (PLS-DA) and Orthogonal-PLS (OPLS-DA) methods.
(EN)
/aggregator-openarchives/portal/institutions/uoa
