Στα πλαίσια της παρούσας διατριβής, μελετήθηκε το γονίδιο CG12701 (FlyBase),
συνώνυμο των vfl (vielfaltig) και zld (zelda – Zinc-finger early Drosophila
activator) της Drosophila melanogaster που κωδικοποιεί έναν μεταγραφικό
παράγοντα που αναφέρεται ως Zelda.Η έκφραση του γονιδίου ανιχνεύθηκε με RT-PCR
και στα τέσσερα αναπτυξιακά στάδια της Drosophila. Επιπλέον, με τη χρήση
ειδικού αντισώματος έναντι της Zelda προσδιορίστηκε με ανάλυση κατά Western η
παραγωγή της πρωτεΐνης σε όλα τα στάδια ανάπτυξης και με πειράματα
ανοσοϊστοχημείας εντοπίστηκε το πρότυπό της σε ιστούς εμβρύου και προνύμφης. Η
υπερέκφραση ή η καταστολή της έκφρασης του γονιδίου zelda στον αναπτυσσόμενο
ιστό του φτερού της Drosophila, υπέδειξαν ένα σαφή ρόλο στη διαδικασία
καθορισμού του αναπτυξιακού προτύπου, ενώ οι φαινότυποι των αντιστοίχων
πειραμάτων συνέτειναν στη δράση του στο σηματοδοτικό μονοπάτι Notch. Με
πειράματα ChIP ανιχνεύθηκε πρόσδεση της Zelda σε επιλεγμένη περιοχή του
γονιδίου omb, ~1000bp αναρροϊκά της 5΄ UTR.Τα αποτελέσματα της διατριβής
δείχνουν ένα σαφή ρόλο του υπό μελέτη γονιδίου στις διαδικασίες ανάπτυξης του
φτερού και υποδεικνύουν τη συμμετοχή του στο σηματοδοτικό μονοπάτι Notch.
Ωστόσο, η εύρεση της πρόσδεσης του μεταγραφικού παράγοντα σε περιοχή εσωνίου
του γονιδίου omb, δεν μπορεί να αποκλείσει την ταυτόχρονη συμμετοχή του σε
περισσότερα του ενός σηματοδοτικά μονοπάτια.
(EL)
In the present study, we studied the gene CG12701 (FlyBase) synonym to
vielfaltig) and zld (zelda – Zinc-finger early Drosophila activator) of the
Drosophila melanogaster, that codes for a transcription factor reported as
Zelda. The transcription of the gene zelda was detected in all four
developmental stages of Drosophila by RT-PCR experiments. Moreover, using
specific antibody raised against Zelda, Western Blotting experiments showed
production of the protein throughout development while immunohistochemical
experiments revealed the pattern of production of Zelda in embryonic and larval
tissues. Overexpressing or knocking down Zelda in the developing wing tissue,
showed a certain role of the gene in patterning processes. The phenotypes of
several of these experiments indicated its action within the Notch signaling
pathway. ChIP experiments revealed binding of Zelda to the omb region ~1000 bp
upstream the 5’UTR of the gene. The results of this study show a certain role
of Zelda in wing development and consider it as possible candidate to be
involved in the Notch cascade. However, the results that showed binding of
Zelda on an intronic region of omb cannot exclude the fact of its involvement
in more than one signaling pathways.
(EN)
/aggregator-openarchives/portal/institutions/uoa
