Τα τελευταία χρόνια τα δείγματα κοπράνων θεωρούνται πολύτιμη επιλογή έρευνας στο πεδίο των βιοεπιστημών αφού μπορούν να συλλεχθούν μη επεμβατικά, σε μεγάλες ποσότητες και να προσφέρουν πολύτιμες πληροφορίες για τις πολύπλοκες αλληλεπιδράσεις μεταξύ της μικροβιακής χλωρίδας και του ατόμου (ξενιστή). Στις μέρες μας είναι πλέον ευρέως γνωστό πως η διαταραχή της ισορροπίας στους πληθυσμούς της εντερικής μικροχλωρίδας συνδέεται με την εμφάνιση πλήθους δυσλειτουργιών και παθήσεων. Ιδιαίτερο ενδιαφέρον σε όλο αυτό το πεδίο παρουσιάζει και η μελέτη της σύστασης των κοπράνων καθώς και η συσχέτιση αυτής με τη διατροφή. Η διερεύνηση των επιπτώσεων που επιφέρουν στην ανθρώπινη υγεία οι διατροφικές συνήθειες και κατ' επέκταση τα φυσικά προϊόντα, αποκαλύπτει ενδιαφέροντα ευρήματα. Στη παρούσα μελέτη σαράντα δείγματα ανθρωπίνων κοπράνων, είκοσι υγιών εθελοντών και είκοσι ασθενών ατόμων με Φλεγμονώδη Νόσο του Εντέρου (ΦΝΕ), μελετήθηκαν. Όσον αφορά τα Φλεγμονώδη Νοσήματα του Εντέρου, οι έρευνες έχουν δείξει ότι τα νοσήματα αυτά σχετίζονται με διαταραχές του ανοσοποιητικού συστήματος που προστατεύει τον οργανισμό από λοιμώξεις, ιούς και μικρόβια. Σήμερα, ιδιαίτερα στον ανεπτυγμένο κόσμο, οι τάσεις εμφάνισης τέτοιων νοσημάτων είναι αυξητικές. Σκοπό της μελέτης αυτής αποτέλεσε η ανάπτυξη κατάλληλης μεθοδολογίας για την ανάλυση δειγμάτων ανθρωπίνων κοπράνων με την τεχνική της υγρής χρωματογραφίας υπερυψηλής απόδοσης συζευγμένη με φασματομετρία μάζας υψηλής διακριτικής ικανότητας (UHPLC-ΗRMS). Επιπλέον, σκοπό αποτέλεσε η σύγκριση μεταξύ υγιών εθελοντών και ασθενών με ΦΝΕ μέσω μεταβολομικής μελέτης. Πιο αναλυτικά, πραγματοποιήθηκε έρευνα για την επιλογή ενός κατάλληλου συστήματος εκχύλισης, με γνώμονα την απόκτηση ενός γενικού και αντιπροσωπευτικού μεταβολικού αποτυπώματος των δειγμάτων κοπράνων. Επίσης, επιχειρήθηκε ανάπτυξη αλλά και επικύρωση κατάλληλης μεθόδου ανάλυσης βασισμένη στη τεχνική UHPLC-ΗRMS. Στο κομμάτι της μεταβολομικής μελέτης, στόχος ήταν η ανεύρεση πιθανών συσχετίσεων μεταξύ των υγιών εθελοντών και των ασθενών με ΦΝΕ αλλά και η ανεύρεση πιθανών μορίων-βιοδεικτών.
(EL)
In recent years, stool specimens have been considered as a valuable research option in the field of life sciences since they can be collected non-invasively in large quantities and provide valuable information on the complex interactions between the microbial flora and the host. Nowadays, it is widely known that the disorder of equilibrium in the intestinal microflora population is associated with the occurrence of a variety of malfunctions and diseases. Of particular interest in this field is the study of faecal composition as well as its correlation with nutrition. Exploring the effects of eating habits and, by extension, natural products on human health, are revealing interesting findings. In the present study, forty samples of human faeces, twenty of healthy volunteers and twenty of patients with Inflammatory Bowel Disease (IBD) were studied. Recent findings has shown that these diseases are related to disorders of the immune system that protect the body from infections, viruses and microbes. Today, especially in the developed world, trends in such diseases are increasing. The purpose of this study was to develop a suitable methodology for the analysis of human stool specimens by ultra high performance liquid chromatography coupled with high resolution mass spectrometry (UHPLC-HRMS). In addition, the aim was to compare healthy volunteers and patients with IBD through a metabolomic study. More specifically, research has been carried out to select a suitable extraction system in order to obtain a general and representative metabolic fingerprint of stool specimens. Also, it was attempted to develop and validate an analytical method based on the UHPLC-HRMS technique. In the part of the metabolomic study, the aim was to find possible correlations between healthy volunteers and patients with IBD, as well as possible biomarkers.
(EN)
/aggregator-openarchives/portal/institutions/uoa
