Το μέλι είναι ένα φυσικό προϊόν διατροφής, ευρέως γνωστό για την υψηλή διατροφική και φαρμακευτική του αξία. Έχει πλούσια χημική σύσταση και ένα σύνολο μοναδικών ευεργετικών ιδιοτήτων. Για την πρόληψη των βακτηριακών λοιμώξεων των μελισσών και τη διασφάλιση της παραγωγής μεγάλων ποσοτήτων αυτού του γλυκαντικού, χρησιμοποιούνται διαφορετικά αντιβιοτικά. Ωστόσο, η χορήγηση αντιβιοτικών σε αυτά τα έντομα, καταχρηστική τις περισσότερες φορές, οδηγεί σε υπολείμματα αντιβιοτικών στο μέλι. Δεδομένου ότι προορίζεται για ανθρώπινη κατανάλωση, εγείρονται ζητήματα ασφάλειας τροφίμων και ανησυχίες για τη δημόσια υγεία. Επομένως, η παρακολούθηση και ο προσδιορισμός των υπολειμμάτων αντιβιοτικών στο μέλι είναι απαραίτητη.
Στην παρούσα μεταπτυχιακή διπλωματική εργασία αναπτύσσεται μια απλή, γρήγορη και αποτελεσματική μέθοδος για τον ταυτόχρονο προσδιορισμό 23 αντιβιοτικών στο μέλι. Εφαρμόζεται η τεχνική Dispersive Liquid Liquid Micro-Extraction (DLLME) για μια γρήγορη και φιλική προς το περιβάλλον προετοιμασία δειγμάτων αυτής της πολύπλοκης μήτρας. Δεδομένου ότι τα αντιβιοτικά βρίσκονται σε επίπεδα συγκέντρωσης ιχνών, η ανάλυση πραγματοποιείται με UHPLC-ESI(+)-MS/MS, χάρη στην επιλεκτικότητα και την ευαισθησία αυτής της τεχνικής. Πραγματοποιούνται πειραματικές δοκιμές προκειμένου να επιλεχθεί το βέλτιστο σύστημα διαλυτών που μεγιστοποιεί την ανάκτηση, μειώνοντας την επίδραση μήτρας. Η μέθοδος που αναπτύσσεται επικυρώνεται σύμφωνα με τις κατευθυντήριες οδηγίες του Κανονισμού (ΕΕ) 808/2021. Η επικύρωση πραγματοποιείται ως προς την ορθότητα, την επαναληψιμότητα, την ενδοεργαστηριακή αναπαραγωγιμότητα και την ανιχνευσιμότητα. Επίσης, μελετάται η περιοχή εργασίας και το φαινόμενο επίδρασης μήτρας. Τα αποτελέσματα επικύρωσης καταδεικνύουν ότι η αναλυτική μέθοδος συμμορφώνεται με τα κριτήρια που ισχύουν για τα σχετικά χαρακτηριστικά απόδοσης και είναι κατάλληλη για τον σκοπό για τον οποίο προορίζεται.
(EL)
Honey is a natural food product, widely known for its high nutritional and medicinal value. It has a rich chemical composition and a set of unique beneficial properties. In order to prevent bacterial infections of honeybees and ensure the production of large quantities of this sweetener, different antibiotics are employed. However, antibiotic administration to these insects, abusive most of the times, leads to antibiotic residues in honey. Since it is intended for human consumption, food safety issues and public health concerns arise. Therefore, monitoring and determination of antibiotic residues in honey is essential.
In this master thesis, a simple, fast and effective method for the simultaneous determination of 23 antibiotics in honey is developed. Dispersive Liquid Liquid Micro-Extraction (DLLME) technique is implemented for a quick and environmentally friendly sample preparation of this complex matrix. Given that antibiotics are present at trace concentration levels, analysis is performed by UHPLC-ESI(+)-MS/MS, thanks to selectivity and sensitivity of this technique. Experimental tests are conducted in order to select the optimal solvent system which maximizes the recovery, reducing matrix effects. The developed method is validated according to the guidelines of Regulation (EU) 2021/808. Validation is carried out in terms of trueness, repeatability, within-laboratory reproducibility and detectability. Also, working range and matrix effect is studied. The validation results demonstrate that the developed analytical method complies with the criteria applicable for the relevant performance characteristics and it is suitable for the purpose for which it is intended.
(EN)
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
