Στην παρούσα ερευνητική εργασία διπλώματος ειδίκευσης πραγματοποιήθηκε μελέτη της
έκφρασης κυκλικών RNAs (circRNAs) σε CD138+ κύτταρα μυελού των οστών ασθενών με
πολλαπλό μυέλωμα (ΜΜ), έρπον πολλαπλό μυέλωμα (SMM) και μονοκλωνική γαμμοπάθεια
αδιευκρίνιστης σημασίας (MGUS). Ορισμένα κυκλικά RNA έχει βρεθεί να σχετίζονται με την
εμφάνιση και εξέλιξη του πολλαπλού μυελώματος, επηρεάζοντας το μικροπεριβάλλον του όγκου
και την ανταπόκρισή του στη χημειοθεραπεία, γεγονός που τα καθιστά πιθανούς διαγνωστικούς
και προγνωστικούς βιοδείκτες για την συγκεκριμένη ασθένεια. Η διάκριση μεταξύ του πολλαπλού
μυελώματος και των πρόδρομων σταδίων της μονοκλωνικής γαμμοπάθειας αδιευκρίνιστης
σημασίας και του έρποντος πολλαπλού μυελώματος είναι σημαντική για την βελτιστοποίηση της
θεραπείας της νόσου και την αύξηση του προσδόκιμου ζωής των ασθενών, δεδομένου πως τα
αρχικά στάδια της νόσου είναι σε μεγάλο βαθμό ασυμπτωματικά.
Ο σκοπός της παρούσας ερευνητικής εργασίας διπλώματος ειδίκευσης ήταν η επιβεβαίωση
της ύπαρξης κυκλικών RNA που στην βιβλιογραφία αναφέρονται πως εντοπίστηκαν σε δείγματα και καρκινικές σειρές πολλαπλού μυελώματος και η στατιστική αξιολόγηση της έκφρασής τους
και της χρήσης τους ως πιθανοί διαγνωστικοί και προγνωστικοί βιοδείκτες. Η πειραματική
διαδικασία που ακολουθήθηκε ήταν η εξής: Αρχικά, τα κυκλικά RNA circCCT3, circATIC και
circPVT1, τα οποία από προηγούμενες μελέτες είχαν ήδη συσχετιστεί με το πολλαπλό μυέλωμα,
εντοπίστηκαν με την χρήση της τεχνικής αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (Polymerase
Chain reaction-PCR) στις κυτταρικές σειρές L-363, U266 και H929, ενώ έπειτα ερευνήθηκε η
έκφραση του circCCT3 σε 46 δείγματα ασθενών με πολλαπλό μυέλωμα, έρπον πολλαπλό
μυέλωμα και μονοκλωνική γαμμοπάθεια αδιευκρίνιστης σημασίας μέσω της εκτέλεσης ποσοτικής
αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης. Ακολούθησε βιοστατιστική ανάλυση, η οποία έδειξε πως
το circCCT3 εκφράζεται περισσότερο σε ασθενείς με πολλαπλό μυέλωμα σε σύγκριση με
ασθενείς με έρπον πολλαπλό μυέλωμα και μονοκλωνική γαμμοπάθεια αδιευκρίνιστης σημασίας
και πως αποτελεί ένα πιθανό διαγνωστικό βιοδείκτη για το πολλαπλό μυέλωμα, όπως αναδείχθηκε
υστέρα από την πραγματοποίηση ανάλυσης ROC.
(EL)
In the present thesis, research of the expression of circular RNAs (circRNAs) was
conducted in CD138+ bone marrow cells taken from patients with multiple myeloma, smoldering
multiple myeloma (SMM) and monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS).
Multiple myeloma is a hematological malignancy in which clonal plasma cells infiltrate the bone
marrow and a monoclonal immunoglobulin is usually found in the serum and/or urine, while
smoldering multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined significance
constitute common precursor states of multiple myeloma. Circular RNAs are a category of singlestranded
RNAs that have a closed loop structure, have been discovered relatively recently and
seem to possess a variety of functions, such as miRNA and RBP sponges. Some circRNAs have
been found to be related to the emergence and evolution of multiple myeloma by influencing the
tumor microenvironment and its response to chemotherapy. The above fact marks them as possible
diagnostic and prognostic biomarkers for the specific disease. Distinguishing symptomaticmultiple myeloma from the precursor stages of monoclonal gammopathy of undetermined
significance and smoldering multiple myeloma is important for the improvement of disease
therapy and the increase of patient life expectancy, given that the precursor states of the
malignancy are mostly asymptomatic.
The purpose of the present thesis was the confirmation of the existence of circular RNAs
that were mentioned by previous studies to be found in multiple myeloma samples and cell lines
and the statistical evaluation of their expression and their potential use as diagnostic and prognostic
biomarkers. In general, the experimental procedure that was implemented is as follows: Initially,
circRNAs circCCT3, circATIC and circPVT1, which from previous studies were already
associated with multiple myeloma, were found in L-363, U266 and H929 cell lines with the method
of PCR and then the expression of circCCT3 was investigated by using real-time PCR in 46
samples of patients with monoclonal gammopathies. The biostatistical analysis that followed
showed that circCCT3 is expressed more in patients with multiple myeloma compared to patients
with smoldering multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined significance
and that it constitutes a possible diagnostic biomarker as it was indicated by performing ROC
analysis.
(EN)
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
