1. Αρχική σελίδα
  2. Αναζήτηση

Ανάπτυξη νανοανιχνευτών για τη στοχευμένη μοριακή ανίχνευση και απεικόνιση των μικρομεταστάσεων

Το τεκμήριο παρέχεται από τον φορέα :
Εθνικό Κέντρο Τεκμηρίωσης και Ηλεκτρονικού Περιεχομένου (ΕΚΤ)   

Αποθετήριο :
Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών  | ΕΚΤ ΕΑΔΔ   

δείτε την πρωτότυπη σελίδα τεκμηρίου
στον ιστότοπο του αποθετηρίου του φορέα για περισσότερες πληροφορίες και για να δείτε όλα τα ψηφιακά αρχεία του τεκμηρίου*



Development of a quantum dot labeled magnetic immunoassay method for the detection of circulating tumour cells and micrometastases
Ανάπτυξη νανοανιχνευτών για τη στοχευμένη μοριακή ανίχνευση και απεικόνιση των μικρομεταστάσεων
Perikleous, Periklis
Περικλέους, Περικλής
PhD Thesis
2015
Η ανίχνευση των κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων (CTCs είναι σημαντική καθώς αυτά προσδιορίζουν τη διασπορά της νόσου και την πιθανότητα ύπαρξης μικρομεταστάσεων οι οποίες δεν είναι ακόμα αντιληπτές με τις κλασσικές μεθόδους.Επομένως, τα κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα αποτελούν προγνωστικό δείκτη σε μεταστατικό καρκίνο.H ανάπτυξη μεθοδολογίας για την έγκαιρη ανίχνευση των CTCs με χρήση ειδικών νανοανιχνευτών βασισμένων σε αντισώματα συζευγμένα με κβαντικά κοκκία σεληνιούχου καδμίου (QDs σε συνδυασμό με το μαγνητικό ανοσοδιαχωρισμό των CTCs.Αντισώματα έναντι των βιοδεικτών EpCAM και CK , κυτταρική σειρά DLD- , μαγνητικά σφαιρίδια συζευγμένα με στρεπταβιδίνη,QDs. Η μέθοδος βασίζεται στον ανοσομαγνητικό διαχωρισμό των CTCs από τα σωματικά υγρά και τη σύζευξή τους με QDs, χρησιμοποιώντας ειδικά αντισώματα. Το σήμα ανίχνευσης λαμβάνεται από τον φθορισμό των QDs. Η μέθοδος χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση των κυττάρων DLD- και CTCs από δείγματα περιφερικού αίματος ασθενών.Ως ελάχιστο όριο ανίχνευσης ορίστηκαν τα 10 CTCs/ml. Η ποσοτικοποίηση πραγματοποιήθηκε με τη χρήση φασματοφθοριόμετρου ενώ η απόδοση της μεθόδου στα δείγματα των ασθενών ελέγχθηκε με κυτταρομετρία ροής και Real timePCR.Η μέθοδος που αναπτύξαμε συμβάλλει σημαντικά στην ανίχνευση των κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων, με χαμηλότερο κόστος και σε λιγότερο χρόνο από τις σήμερα χρησιμοποιούμενες μεθοδολογίες, διασφαλίζοντας παράλληλα μεγάλη ευαισθησία.
Aim-BackgroundTo evaluate the incorporation of cadmium selenide quantum dots (QDs) in the detection of colorectal cancer (CRC) circulatingtumour cell (CTC) surface antigens.Material and MethodsThe principle of this assay is based upon the separation of CTCs from body fluids using magnetic beads (MBs) coupled withspecific antibody biomarkers, such as the Epithelial cell Adhesion Molecule Antibody (EpCAM) and Cytokeratin 19 (CK19)antibody. The detection signal was acquired from the fluorescence signal of QDs. To evaluate the performance, the methodunder study was used to isolate the human colon adenocarcinoma cell line (DLD- and CTCs from CRC patients’ peripheralblood samples. Peripheral blood samples were obtained from 9 CRC patients and 5 healthy donors who gave their informedconsent to their inclusion in the study. Peripheral venous blood was sampled immediately after CRC patients had receivedgeneral anaesthesia, moments before surgery. In all patients, an intravenous cannula was used to collect blood into 7 mlvacutainers containing sodium ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA). The first 7 ml of blood was discarded in order to reducethe risk of contamination from skin epithelial cells. Subsequently, 30 ml samples were collected at one-minute intervals (five 6 mlaliquots per 30 ml sample).ResultsThe limit of detection (LOD) of the methodology described in the present study was determined at 10 DLD-1 cells/ml of sampleas fluorescence measured with a spectrofluorometer. Fluorescence activated cell sorting (FACS) analysis and Real Time RTPCRwere also used to evaluate the performance of the method. Ultimately, in comparison to other methods currently in use, wedeveloped a simple, sensitive, and more cost-effective method for the detection of CRC CTCs in human samples. Results wereaccomplished using magnetic bead isolation and subsequent QD fluorescence detection.ConclusionThe present method can be readily adjusted to target a variety of proteins of either the CTCs or the host.
Ιατρική και Επιστήμες Υγείας ➨ Ιατρική Βιοτεχνολογία
Medical and Health Sciences
Κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα
Quantum dots
Nanoprobes
Μικρομεταστάσεις
Medical Biotechnology
Micrometastases
Νανοανιχνευτές
Circulating tumor cells
Κβαντικά κοκκία
Καρκίνος
Ιατρική Βιοτεχνολογία
Ιατρική και Επιστήμες Υγείας
Cancer
Ελληνική γλώσσα
National and Kapodistrian University of Athens
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών (ΕΚΠΑ)
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών (ΕΚΠΑ). Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής. Τομέας Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Β' Ακτινολογίας Πανεπιστημιακού Γενικού Νοσοκομείου ΑΤΤΙΚΟΝ
BY_NC_SA
Εθνικό Κέντρο Τεκμηρίωσης και Ηλεκτρονικού Περιεχομένου (ΕΚΤ)
Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών
Συλλογή ΕΑΔΔ



*Η εύρυθμη και αδιάλειπτη λειτουργία των διαδικτυακών διευθύνσεων των συλλογών (ψηφιακό αρχείο, καρτέλα τεκμηρίου στο αποθετήριο) είναι αποκλειστική ευθύνη των αντίστοιχων Φορέων περιεχομένου.