Τα κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα (μικρομεταστάσεις) ανιχνεύονται σε ποσοστό
μεγαλύτερο από 30% των ασθενών με καρκίνο χωρίς κλινική και ιστοπαθολογική
εικόνα μεταστάσεων. Σήμερα, για την ανίχνευση χρησιμοποιούνται μέθοδοι που είτε
έχουν χαμηλό βαθμό ευαισθησίας (ανοσοϊστοχημικές και βιοχημικές αναλύσεις),
είτε είναι πολύ ακριβές (RT-PCR). Σκοπός της μελέτης ήταν η ανάπτυξη ειδικών
νανοανιχνευτών βασισμένων σε αντισώματα συζευγμένα με κβαντικά κοκκία
σεληνιούχου καδμίου (QDs) για την έγκαιρη ανίχνευση των μικρομεταστάσεων.
Η μέθοδος συγκρίθηκε πειραματικά με κυτταρικές σειρές και με δείγματα αίματος
ασθενών με κυτταρομετρία ροής (FACS) και Real-Time PCR και έδειξε μεγάλη
ευαισθησία. Κάτι τέτοιο επιτρέπει τη μελλοντική ενσωμάτωσή της στην κλινική
πράξη, καθώς προσφέρει μοναδικές δυνατότητες για την ανίχνευση μικρομεταστάσεων
in vitro σε κλινικά υλικά ασθενών (αίμα, ορό, ιστό), αλλά και in vivo, καθώς
καθιστούν δυνατή τη μοριακή απεικόνηση των όγκων. Οι νανοανιχνευτές που
αναπτύχθηκαν έχουν τη δυνατότητα ειδικής εντόπισης του όγκου όταν ενεθούν
ενδοφλέβια σε καρκινικά μοντέλα (xenografts) ποντικών.
Συμπερασματικά, η χρήση νανοανιχνευτών συμβάλλει σημαντικά στην ανίχνευση
μικρομεταστάσεων, με χαμηλότερο κόστος και σε λιγότερο χρόνο από τις σήμερα
χρησιμοποιούμενες μεθόδους, διασφαλίζοντας παράλληλα μεγάλη ευαισθησία. Η νέα
αυτή τεχνολογία μπορεί να αποτελέσει σημαντικό εργαλείο στα χέρια χειρουργών,
ογκολόγων και ακτινοθεραπευτών, βοηθώντας στον καλύτερο σχεδιασμό της
θεραπευτικής στρατηγικής και στη βελτίωση της στοχευμένης θεραπείας των όγκων.
(EL)
AIM: To detect of colorectal cancer (CRC) circulating tumour cells (CTCs)
surface antigens, we present an assay incorporating cadmium selenide quantum
dots (QDs) in these paper.
METHODS: The principle of the assay is the immunomagnetic separation of CTCs
from body fluids in conjunction with QDs, using specific antibody
biomarkers:epithelial cell adhesion molecule antibody, and monoclonal
cytokeratin 19 antibody. The detection signal was acquired from the
fluorescence signal of QDs. For the evaluation of the performance, the method
under study was used to isolate the human colon adenocarcinoma cell line
(DLD-1) and CTCs from CRC patients’ peripheral blood.
RESULTS: The minimum detection limit of the assay
was defined to 10 DLD-1 CRC cells/mL as fluorescence was measured with a
spectrofluorometer. Fluorescenceactivated
cell sorting analysis and Real Time RT-PCR,
they both have also been used to evaluate the performance of the described
method. In conclusion, we developed a simple, sensitive, efficient and of lower
cost (than the existing ones) method for the detection of CRC CTCs in human
samples. We have accomplished
these results by using magnetic bead isolation and subsequent QD fluorescence
detection.
CONCLUSION: The method described here can be
easily adjusted for any other protein target of either the CTC or the host.
(EN)
/aggregator-openarchives/portal/institutions/uoa
