Αντικείμενο της παρούσας μελέτης αποτέλεσαν τα φυτοπαθογόνα είδη Ceratocystis platani και C. ficicola (Ασκομύκητες) στον Ελλαδικό χώρο, και τα οποία βιογεωγραφικά θεωρούνται αλλόχθονα και εισβλητικά για την περιοχή αυτή. Έγινε σύντομη ανασκόπηση των γνωστών ξενιστών τους στην Ελλάδα και των επιπτώσεων σε αυτούς καθώς και της ευρύτερης γεωγραφικής παρουσίας τους. Κατά την παρούσα μελέτη εντοπίστηκαν και επιπλέον στελέχη που απομονώθηκαν από συκιά και εδώ συζητήθηκαν ως Ceratocystis sp..
Πειραματικά έγινε έλεγχος εργαστηριακών μεθόδων ανίχνευσης και απομόνωσης στελεχών ειδών Ceratocystis από δείγματα προσβεβλημένων φυτικών ιστών και έδαφος. Δοκιμάστηκε η δολωματική μεθοδολογία ανίχνευσης των Ceratocystis και ελέγχθηκε με σειρά χειρισμών, η ευαισθησία αυτής. Επιπλέον, εξετάστηκε η χρησιμότητα διαφόρων θρεπτικών υποστρωμάτων στην in vitro μελέτη των επιλεγμένων στελεχών C. platani, C. ficicola και Ceratocystis sp. στο εργαστήριο και η αποτελεσματικότητα αυτών σε συνάρτηση με το υλικό από το οποίο επιχειρείται η απομόνωση.
Τα πειράματα με τα θρεπτικά υποστρώματα και τη δολωματική μεθοδολογία ανέδειξαν διαφοροποιήσεις αναφορικά με τη βιολογία και τη φυσιολογία των διαφόρων στελεχών των ειδών. Παράλληλα, εξετάστηκε η ανάπτυξη των στελεχών C. platani, C. ficicola και Ceratocystis sp. σε εύρος θερμοκρασιών 5-35 oC.
Έμφαση δόθηκε στη μικροσκοπική μελέτη των επιλεγμένων στελεχών Ceratocystis και πραγματοποιήθηκαν μετρήσεις σε μορφολογικούς χαρακτήρες ειδικότερα στα παραγόμενα περιθήκια (ασκώματα) και τα είδη σπορίων και από τις μικροσκοπικές και μορφομετρικές αυτές παρατηρήσεις παράχθηκαν χρήσιμα δεδομένα.
Επιπρόσθετα, πραγματοποιήθηκε μοριακός χαρακτηρισμός των στελεχών ειδών Ceratocystis με την αλληλούχιση της περιοχής ITS (Internal Transcribed Spacer) του γονιδιώματος και με τη δημιουργία φυλογενετικού δένδρου αποδόθηκε η μεταξύ τους συγγένεια. Αναδείχθηκε από την εξέταση αυτή η αναγκαιότητα περαιτέρω πληθυσμιακών μελετών του γένους Ceratocystis στην Ελλάδα.
Τέλος, αξιολογήθηκε η παθογένεια τους επί φυτικών ξενιστών σε σύντομα, σε χρόνο και έκταση, πειράματα τεχνητών μολύνσεων.
Όλα τα δεδομένα συνδυάστηκαν στην παραγωγή χρήσιμων συμπερασμάτων για τα στελέχη C. platani, C. ficicola και Ceratocystis sp., ως προς την απομόνωση, την ανάπτυξη, τους διαγνωστικούς χαρακτήρες και την παθογένειά τους. Βασικότερο αποτέλεσμα αποτελεί η αναγνώριση της συκιάς (Ficus carica) για πρώτη φορά ως ξενιστής του Ceratocystis sp., σε απομονώσεις από το πεδίο και σε τεχνητές μολύνσεις και του C. platani σε τεχνητές μολύνσεις.
(EL)
The subject of this thesis was the study of plant pathogen species of Ceratocystis platani and C. ficicola (Ascomycota) that are present in Greece; Ceratocystis species are considered alien and invasive in this biogeographical region. A short review of their presence in the country was given; in terms of native plant hosts affected, impact on them and geographical distribution. Isolates from infected Ficus carica plants in the field, resembling C. platani were isolated; these are discussed in the current study as Ceratocystis sp..
Protocols and methods for the detection and isolation of Ceratocystis from field samples were experimentally evaluated in the laboratory. The baiting method was also evaluated for these species of Ceratocystis in an assay of spore suspensions. Substrates were tested in the laboratory for their efficacy in isolation of Ceratocystis and in relation with the material that the isolation was attempted from.
Experimentation with protocols of substrates and baiting highlighted differences in biology and physiology of C. platani, C. ficicola and Ceratocystis sp., furthermore mycelial growth in assay of temperatures 5 to 35oC was examined.
Perithecia (ascomata) and all spore types were examined and measured under the microscope, data were collected and statistically analysed and assembled and other observations were recorded.
The ITS region of the genome of C. platani, C. ficicola and Ceratocystis sp. was sequenced; isolates of the study were identified in species level on these molecular data and a phylogeny tree revealing the relations was produced. The results of phylogeny are pointing to the need of further population studies in the genus Ceratocystis in Greece.
Finally, a brief, in scale and duration, inoculation experiment took place in order to test pathogenicity in host plants.
All data were assembled, and conclusions were reached concerning strains of C. platani, C. ficicola and Ceratocystis sp. involved in this study regarding their isolation in the laboratory, growth, morphological characters and pathogenicity. Ficus carica is proven for the first time host of C. platani in inoculation trials and of Ceratocystis sp. in both field and inoculation trials.
(EN)
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
