Στις Η.Π.Α, ο καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) είναι η τρίτη κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο τόσο στους άνδρες όσο και στις γυναίκες, ενώ στην Ελλάδα αποτελεί την δεύτερη κύρια αιτία θανάτου, με αύξηση κατά 12% την περίοδο 2011 με 2019. Αυξανόμενη ιατρική σημασία έχουν αποκτήσει τα προβιοτικά λόγω της ευεργετικής τους επίδρασης στον ανθρώπινο οργανισμό που συνδέεται με την πρόληψη και τη θεραπεία πολλών χρόνιων ασθενειών, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου. Σημαντικό ρόλο στη δημιουργία και εξέλιξη του CRC διαδραματίζει η αλληλεπίδραση των καρκινικών κυττάρων με τον εξωκυττάριο χώρο (ECM). Τα ένζυμα που αποικοδομούν τον ECM, όπως οι μεταλλοπρωτεϊνάσες (MMPs), διαδραματίζουν κρίσιμο ρόλο στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση και την αναδιαμόρφωση του ECM. Στον CRC, η έκφραση και των MMPs συσχετίζεται με προχωρημένο στάδιο της νόσου και την κακή της πρόγνωση.
Στην παρούσα εργασία, μελετήθηκε το προβιοτικό Lactobacillus acidophilus, με σκοπό να ανιχνευθεί η επίδραση του στην έκφραση των μεταλλοπρωτεϊνασών-1 (MMP-1) και -9 (MMP-9) σε καρκινικά κύτταρα παχέος εντέρου. Για τον σκοπό αυτό, αρχικά, καλλιεργήθηκαν οι δύο καρκινικές κυτταρικές σειρές, οι Caco-2 και HT-29, παρουσία του θρεπτικού μέσου του προβιοτικού L. acidophilus. Στην συνέχεια, έγινε απομόνωση του ολικού RNA των καρκινικών κυττάρων, σύνθεση cDNA και τέλος πραγματοποιήθηκε real-time PCR ώστε να μελετηθούν τα επίπεδα έκφρασης των γονιδίων της MMP-1 και MMP-9. Στην καρκινική σειρά Caco2 παρατηρήθηκε υπερέκφραση και των δύο MMPs, ενώ στην HT29, η υπερέκφραση περιορίστηκε μόνο στην ΜΜΡ-1, καθώς η ΜΜΡ-9 δεν διαφοροποιήθηκε. Γεγονός που μας δείχνει ότι η παρουσία του προβιοτικού L. acidophilus μπορεί να έχει αρνητική εξέλιξη στην πορεία της νόσου αν χορηγηθεί μόνο του σε ασθενείς με CRC.
(EL)
In the U.S.A, colorectal cancer (CRC) is the third leading cause of cancer death in both men and women, while in Greece it is the second leading cause of death, with a 12% increase between 2011 and 2019. Probiotics have gained increasing medical importance due to the beneficial effect on the human body associated with preventing and supporting the treatment of many chronic diseases, including cancer, without side effects. An important role in the creation and evolution of CRC is played by the interaction of cancer cells with the extracellular matrix (ECM). The proteins that degrades the ECM, such as metalloproteinases (MMPs), play a critical role in cell proliferation, migration and remodeling of the ECM. In CRC, the expression of both MMPs is associated with advanced disease stage and poor prognosis.
In this study, the probiotic Lactobacillus acidophilus was studied to detect its effect on the gene expression of the metalloproteinases MMP-1 and MMP-9 in Caco-2 and HT-29 colon cancer cells. For this purpose, initially, two cancer cell lines were cultured, as well as the probiotic L. acidophilus. Afterwards, the total RNA of the cancer cells was isolated, cDNA was synthesized, and finally real-time PCR was performed to study the gene expression levels. In the Caco2 cancer line, overexpression of both MMPs was observed, while in HT29, overexpression was limited to MMP-1 only, as MMP-9 did not differentiate. This suggests that the presence of the probiotic L. acidophilus may have a negative progression in the course of the disease if administered alone to patients with CRC.
(EN)
/aggregator-openarchives/portal/institutions/uoa
