δείτε την πρωτότυπη σελίδα τεκμηρίου στον ιστότοπο του αποθετηρίου του φορέα για περισσότερες πληροφορίες και για να δείτε όλα τα ψηφιακά αρχεία του τεκμηρίου*
Μελέτη της έκφρασης του κυκλικού RNA circCCT3 σε μονοπύρηνα κύτταρα περιφερικού αίματος ασθενών με χρόνια Β-λεμφοκυτταρική λευχαιμία
Η χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία αποτελεί την πιο συχνή μορφή λευχαιμίας στους ενήλικες του δυτικού κόσμου και χαρακτηρίζεται από την σταδιακή συσσώρευση ώριμων Β-λεμφοκυττάρων στο αίμα, στον μυελό τον οστών και στους λεμφαδένες. Τα κυκλικά μόρια RNA (circRNA) είναι μια νέα κατηγορία ενδογενών μη κωδικών μορίων RNA τα οποία αποτελούν προϊόντα εναλλακτικής συρραφής που προκύπτουν μέσω του μηχανισμού οπίσθιας συρραφής. Επηρεάζουν ένα ευρύ φάσμα βιολογικών διεργασιών κυρίως μέσω της αλληλεπίδρασης με πρωτεΐνες και microRNAs. Όλο και περισσότερο τα circRNA αναγνωρίζονται ως ρυθμιστές των φυσιολογικών και παθολογικών χαρακτηριστικών των κυτταρικών πληθυσμών που προέρχονται από την διαφοροποίηση των αρχέγονων αιμοποιητικών κυττάρων. Ειδικότερα, αρκετά circRNA
βρέθηκαν να ενισχύουν ή να καταστέλλουν την εξέλιξη του όγκου στις αιματολογικές κακοήθειες όπως οι λευχαιμίες και τα λεμφώματα. Το circCCT3 προάγει την εξέλιξη του πολλαπλού μυελώματος μέσω του ρυθμιστικού άξονα miR-610/AKT3 ωστόσο, ο ρόλος του στην ΧΛΛ παραμένει άγνωστος. Έτσι, αντικείμενο μελέτης της παρούσας διπλωματικής εργασίας αποτέλεσε η μελέτη της έκφρασης του κυκλικού circCCT3 σε δείγματα ασθενών με ΧΛΛ. Για τον σκοπό αυτό, πραγματοποιήθηκε απομόνωση RNA από 10 δείγματα ασθενών και αντίστροφη μεταγραφή αυτού με χρήση εκκινητών τυχαίων εξαμερών. Ακολούθησε μια σειρά πειραμάτων 1ου και 2ου κύκλου PCR με χρήση αποκλίνοντων εκκινητών, και έπειτα ποσοτικός προσδιορισμός της έκφρασης του circCCT3 με αντιδράσεις real time qPCR αξιοποιώντας τη φθορίζουσα χρωστική SYBR Green I. Στο τέλος, πραγματοποιήθηκε στατιστική ανάλυση, όπου συσχετίστηκε η έκφραση του circCCT3 με τα κλινικοπαθολογικά χαρακτηριστικά των ασθενών. Οι διαφορές στην έκφραση που παρατηρήθηκαν στα δείγματα των ασθενών δεν φάνηκε να συσχετίζονται σατιστικώς σημαντικά με τις μεταβλητές που μελετήθηκαν, πιθανώς λόγω του μικρού δείγματος. Η κατανόηση του τρόπου έκφρασης του circCCT3 και της σχέσης ανάμεσα στην έκφραση του με τα διάφορα κλινοπαθολογικά χαρακτηριστικά των ασθενών μπορεί να συνεισφέρει σημαντικά στην καλύτερη αντιμετώπιση της νόσου.
(EL)
Chronic lymphocytic leukemia is the most common type of leukemia in adults in the western world and is characterized by the progressive accumulation of mature B lymphocytes in peripheral blood, bone marrow and lymph nodes. Circular RNAs (circRNAs) are a new class of endogenous non-coding RNAs that are products of alternative splicing, arise through the back-splicing mechanism. They affect a wide range of biological processes mainly through interaction with proteins and microRNAs. CircRNAs have been increasingly recognized as modulators of physiological and pathological features of hematopoetic stem cell (HSC)-derived populations. In particular, several circRNAs were found to enhance or suppress tumor progression in hematological malignancies such as leukemias and lymphomas. CircCCT3 promotes multiple myeloma progression through the miR-610/AKT3 regulatory axis however, its role in CLL remains unknown. The aim of this thesis was to study the expression levels of circCCT3 in CLL patient samples. For this purpose, RNA isolation from 10 patient samples and reverse transcription of this RNA was performed using random hexamer primers. This was followed by a series of 1st and 2nd cycle PCR experiments using divergent primers, and then quantification of circCCT3 expression by real time qPCR reactions utilizing the fluorescent dye SYBR Green I. Finally, statistical analysis was performed, where circCCT3 expression was correlated with the clinicopathological characteristics of the patients. The differences in expression observed in the patient samples did not seem to correlate
statistically significantly with the variables studied, probably due to the small sample size.
Understanding how circCCT3 is expressed and the relationship between its expression and the various clinicopathological features of patients may contribute significantly to better management of the disease.
(EN)
*Η εύρυθμη και αδιάλειπτη λειτουργία των διαδικτυακών διευθύνσεων των συλλογών (ψηφιακό αρχείο, καρτέλα τεκμηρίου στο αποθετήριο) είναι αποκλειστική ευθύνη των αντίστοιχων Φορέων περιεχομένου.
Βοηθείστε μας να κάνουμε καλύτερο το OpenArchives.gr.
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
